طريقة بصرية حساسة للكشف عن البكتيريا المنتجة لكبريتيد الهيدروجين

ابدأ بصفيحة تحتوي على تعليق من العديد من البكتيريا المنتجة لكبريتيد الهيدروجين القادرة على استقلاب المركبات الغنية بالكبريت.

أضف محلول كلوريد البزموت الذي يحتوي على L-cysteine كمصدر للكبريت واحتضن الخليط لفترة وجيزة.

أثناء الحضانة, تستخدم البكتيريا لسيستين وتنتج كبريتيد الهيدروجين, الذي يتفاعل مع أيونات البزموت لتشكيل راسب كبريتيد البزموت الأسود غير القابل للذوبان.

يغير هذا التفاعل لون المحلول من الأصفر الفاتح إلى الأسود ، مما يشير إلى إنتاج كبريتيد الهيدروجين.

بعد ذلك ، قم بإجراء الفحص باستخدام تركيزات متفاوتة من هيدروكبريتيد الصوديوم كمعيار كبريتيد الهيدروجين وأضف كلوريد البزموت.

يؤدي هذا إلى توليد تدرج لوني يتراوح من الضوء إلى الأسود الكثيف ، مما يمثل مستويات كبريتيد الهيدروجين.

الآن ، استخدم هذا التدرج لمقارنة وتقدير مستويات كبريتيد الهيدروجين بصريا في العينات البكتيرية ، مما يتيح الكشف السريع عن البكتيريا المنتجة لكبريتيد الهيدروجين.

امزج 100 ميكرولتر من المزرعة البكتيرية مع 100 ميكرولتر من محلول البزموت المحضر حديثا في ألواح ميكروتيتر 96 بئرا ، وقم بالزراعة لمدة 20 دقيقة عند 37 درجة مئوية. لكل سلالة بكتيرية ، قم بإجراء التحليل ثلاث نسخ.

بعد 20 دقيقة ، تحقق من تغير اللون. إذا تغير لون المحلول من الأصفر الفاتح إلى الأسود ، فهذا يشير إلى أن البكتيريا قادرة على إنتاج كبريتيد الهيدروجين أو H2S. كرر هذا القياس ثلاث مرات.

تحديد حساسية الطريقة باستخدام تركيزات مختلفة من هيدروكبريتيد الصوديوم الممزوج بمحلول كبريتيد الزموقت. أخيرا ، حدد وجود أيونات ثنائي الكبريتيد والكبريتيد من خلال مراقبة تكوين راسب كبريتيد البزموت الأسود. قم بتسجيل لون الآبار باستخدام مقياس مرئي من عدم إنتاج الألوان إلى إنتاج الألوان السوداء الداكنة.