موسوعة JoVE للتجارب
Microbiology
0 مشاهدة • 2:28 دقيقة • October 30th, 2025
ابدأ بطبق زجاجي مزروع بزراعة مشتركة من البكتيريا المتحركة الفلورية والبكتيريا غير المتحركة غير المسماة.
خذ الطبق الذي يحتوي على وسادة الاغاروز المليئة بالمغذيات وقم بإزالة قالب السيليكون المحيط بعناية.
قم بإمالة الطبق واستخدم ملعقة مثنية للانزلاق تحت حافة الوسادة. ثم ضعه على غطاء صفيحة بتر.
انقل الوسادة ، بحيث يكون الجانب السفلي لأسفل ، إلى الطبق الذي يحتوي على الخلايا البكتيرية لضمان ملامسة متساوية للطبقة البكتيرية.
اضغط برفق على الوسادة للتخلص من أي فقاعات هواء.
ضع المناديل المبللة مسبقا حول حافة الطبق للحفاظ على الرطوبة.
تحت المجهر المقلوب ، تتبع السلوك البكتيري على مدى فترة زمنية.
مع نمو البكتيريا ، تطلق البكتيريا غير المتحركة جاذبات كيميائية. تستشعر البكتيريا المتحركة هذه الإشارات وتتحرك نحو المستعمرات البكتيرية غير المتحركة.
بمرور الوقت ، تتراكم البكتيريا المتحركة وتغزو المستعمرات البكتيرية غير المتحركة ، مما يؤكد التفاعلات البكتيرية.
بمجرد أن تجف الوسادات ، قم بإضافة ماصة ميكرولتر واحد من الثقافة المشتركة بالتساوي عبر قاع طبق غطاء زجاجي معقم مقاس 35 ملم مسخن مسبقا.
قم بإزالة فتحة السيليكون من قالب الاغاروز باستخدام ملاقط معقمة ، وقم بإمالتها إلى الجانب ، ثم قم بتمرير ملعقة مثنية قليلا أسفل حافة وسادة الاغاروز لإسقاطها على غطاء صفيحة بتري معقمة.
انقل الوسادة إلى الطبق مع الخلايا البكتيرية ، بحيث يكون الجانب السفلي لأسفل ، عن طريق تحريك ملعقة بزاوية 90 درجة أسفل الوسادة ووضعها فوق شريحة الغطاء الملقحة. استخدم الملعقة لجعل الوسادة تتدفق على الغطاء وتنزلق واضغط برفق على أي فقاعات هواء.
قم بإزالة الرطوبة الزائدة من المناديل الرطبة وضعها حول حافة الطبق ، وتأكد من أنها لا تلمس الوسادة. العينة جاهزة الآن للتصوير.