موسوعة JoVE للتجارب
Microbiology
0 مشاهدة • 2:08 دقيقة • November 28th, 2025
ابدأ بمخزون مجمد من البكتيريا.
استخدم حلقة تلقيح معقمة لوضع البكتيريا المجمدة على صفيحة أجار مغذية. حضن الصفيحة المقلوبة لمنع تكثف الماء على سطح الأجار.
تستخدم البكتيريا العناصر الغذائية، وتنمو على سطح الأجار، وتشكل مستعمرات مرئية مميزة.
اختر مستعمرة واحدة وتلقيحها في وسط سائل يحتوي على مغذيات لبدء زراعة نقية.
حضن الأنبوب تحت ظروف اهتزاز قوية.
الاهتزاز يحافظ على التهوية داخل الأنبوب ويبقي الخلايا معلقة، مما يمنعها من الاستقرار في القاع.
كما يضمن توزيعا متساو للمغذيات في الوسط، مما يعزز نمو البكتيريا بشكل أسي.
ينتج عن ذلك تعليق بكتيريا كثيف ونشط أيضيا.
الزراعة البكتيرية في الوسط السائل جاهزة الآن لمزيد من التجارب.
لاستخدام المخزون، باستخدام حلقة تلقيح معقمة، قم بإزالة كمية صغيرة من المرق المجمد ووضع البكتيريا على شكل خطوط للحصول على مستعمرات فردية على ألواح LB Agar.
حضن الألواح على جانب الغطاء للأسفل لمدة 12-16 ساعة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. احصل على طبق جاهز مسبقا. قم بتلقيح 4 ملليتر من مرق LB السائل في أنبوب زراعة معقم بسعة 10 ملليلتر مع مستعمرة واحدة عن طريق لمس سطح المستعمرة الواحدة بحلقة معقمة ونقل المستعمرة إلى المرق السائل. ثم حضن الثقافة مع التهوية في حاضنة هزاز بسرعة 225 دورة في الدقيقة لمدة 12-16 ساعة عند 37 درجة مئوية.