موسوعة JoVE للتجارب
Biology
0 مشاهدة • 3:45 دقيقة • July 8th, 2025
الفحص المجهري داخل الحيوية عالي الدقة ، عبر نافذة تصوير البنكرياس المزروعة ، التصور الخلوي طويل المدى وواسع النطاق لجزر البنكرياس في حي.
لزرع نافذة تصوير البنكرياس، أولا، ضع الفأر المخدر في الوضع الجانبي الأيسر. بعد ذلك ، قم بإصلاح مسبار لمراقبة درجة حرارة الماوس وتنظيم درجة حرارته باستخدام وسادة تسخين. الآن ، احلق الجناح الأيسر وقم بتعقيم المنطقة.
قم بعمل شق جراحي وتشريح عضلات البطن. أدخل الغرز المناسبة في هامش الشق لتثبيت إطار نافذة التصوير في موضعه بعد الزرع. علاوة على ذلك ، قم بكشف الطحال وإخراجه من الخارج ، وتحديد البنكرياس المتصل.
بعد ذلك ، قم بتراكب البنكرياس المتصل بالطحال على لوحة نافذة تصوير البنكرياس المخصصة ، مع وضع الطحال في المساحة المفتوحة للنافذة. يعمل وضع البنكرياس هذا على عزله بشكل فعال عن حركات الأمعاء المجاورة ، مما يقلل من القطع الأثرية التي تسببها الحركة أثناء التصوير. ضع غراء سيانواكريليت بعناية على هامش نافذة التصوير ، وتجنب الأعضاء.
قم بتركيب غطاء زجاجي على هامش نافذة التصوير. شد الغرز حول نافذة التصوير لتثبيت النافذة في مكانها. الفأر المزود بنافذة تصوير البنكرياس المزروعة جاهز لتصوير البنكرياس داخل الحيوية.
ابدأ بإعداد المنصة الجراحية وتطهير الأسطح بنسبة 70٪ من الإيثانول. بعد التخدير، استخدم مسبارا مستقيميا مع وسادة تسخين يتم التحكم فيها حرارة منزلية لمراقبة درجة حرارة الجسم.
قم بإزالة الشعر من الجانب الأيسر للفأر ووضع الكحول واليود بدلا من ذلك ، بالتناوب من موقع الشق إلى السطح الخارجي ، وعدم العودة إلى موقع الشق وتنتهي باليود. ثم قم بعمل شق بطول 1.5 سم على الجانب الأيسر من الفأر لتشريح الجلد والعضلات.
استخدم خياطة سوداء أو نايلون 4-0 لإجراء خياطة سلسلة محفظة في هامش الشق. اجمع الطحال بعناية باستخدام ملقط حلقي ، وحدد البنكرياس. عند وضع النافذة على جانب الماوس ، قم بتمرير الطحال والبنكرياس عبر المساحة المفتوحة للنافذة.
بعد ذلك ، ضع البنكرياس برفق على لوحة نافذة التصوير أثناء وضع الطحال على المساحة المفتوحة للنافذة. استخدم إبرة قسطرة قياس 31 لوضع قطرات من غراء N-butyl cyanoacrylate على هامش نافذة التصوير ، مما يضمن تطبيق الحد الأدنى من الغراء.
ضع برفق غطاء زجاجي دائري مقاس 12 ملم على هامش نافذة التصوير. بعد ذلك ، أمسك حلقة الخياطة لتلائم الأخدود الجانبي للنافذة واربطها ثلاث مرات. أخيرا ، لمنع انقطاع هذه الغرز الضيقة عندما تكون الفئران مستيقظة ، قم بقص الحد الأقصى للموقع القريب من ربطة العنق.