موسوعة JoVE للتجارب
Immunology
0 مشاهدة • 2:25 دقيقة • July 8th, 2025
خذ شريحة غرفة متعددة الآبار تحتوي على طبقات أحادية الخلايا الدبقية الصغيرة.
في الاختبار جيدا ، قم بتغطية الخلايا ب β-glucan. يفتقر بئر التحكم إلى β جلوكان. حضن.
في بئر الاختبار ، ترتبط β-glucans ، وهي أنماط جزيئية مرتبطة بممرضات ، بمستقبلات محددة على الخلايا الدبقية الصغيرة ، مما يتسبب في بلعمة β الجلوكان.
هذا ينشط الخلايا الدبقية الصغيرة ، وينتج ويطلق جزيئات نشطة بيولوجيا مثل المؤكسدات التفاعلية والسيتوكينات في الوسائط.
اجمع الوسائط التي تحتوي على جزيئات نشطة بيولوجيا من الآبار وقم بتصفيتها لإزالة الحطام و β جلوكان.
قم بتجميد الوسائط في درجات حرارة منخفضة للحفاظ على النشاط البيولوجي للجزيئات النشطة بيولوجيا.
بعد ذلك ، قم بإذابة وإضافة الوسائط إلى شريحة غرفة متعددة الآبار تحتوي على طبقات أحادية من خلايا سرطان الدماغ. حضن.
تؤديالجزيئات النشطة بيولوجيا إلى مسارات إشارات الخلايا ، مما يقلل من تكاثر الخلايا السرطانية ويؤدي إلى موت الخلايا المبرمج.
يشيرانخفاض تكاثر الخلايا السرطانية وزيادة موت الخلايا المبرمج إلى β-جلوكان كعوامل تعزز الخصائص المضادة للأورام للخلايا الدبقية الصغيرة ضد خلايا سرطان الدماغ.
قم بتنشيط الخلايا الدبقية الصغيرة عن طريق طلاء خلايا الخلايا الدبقية الصغيرة BV-2 لمدة 72 ساعة بتركيز 0.2 ملليغرام لكل مليلتر من أربعة بيتا جلوكان مختلفة معزولة من P. ostreatus و P. djamor و G. lucidum و H. erinaceus. بعد 72 ساعة ، اجمع المادة الطافية باستخدام ماصة ، وقم بتمرير الحجم المتبقي من خلال مرشح حقنة 0.20 ميكرومتر. ثم قم بتجميد المادة الطافية عند -80 درجة مئوية لمدة 24 ساعة على الأقل. لعلاج GL261 بالوسط المكيف للخلايا الدبقية الصغيرة المنشط مسبقا ، أضف 250 ميكرولترا من وسط الخلايا الدبقية الصغيرة المعالجة ببيتا جلوكان إلى 80٪ من خلايا GL261 المتجمعة لمدة 72 ساعة.