موسوعة JoVE للتجارب
Neuroscience
0 مشاهدة • 2:52 دقيقة • August 7th, 2025
ضع الفأر في غرفة حث محكمة الغلق متصلة بمدخل لتوصيل الأكسجين المتحكم فيه.
تعريضه لدورات من مستويات الأكسجين المنخفضة المتقلبة ، والتي تسمى التكييف المسبق المتكرر لنقص الأكسجين ، أو RHP.
مع كل دورة من انخفاض الأكسجين ، تنخفض مستويات الأكسجين في الدم لدى الفأر ، مما يخلق حالة نقص الأكسجين.
تتكيف بعض الخلايا العصبية في الدماغ تدريجيا ، وتعدل عملية التمثيل الغذائي للبقاء على قيد الحياة في بيئة منخفضة الأكسجين.
يظل الحاجز الدموي الدماغي ، الذي يحمي الدماغ ، مستقرا ويمنع التهاب الدماغ.
أخرج الماوس من الغرفة واسمح بالاسترداد. بعد ذلك ، قم بتحفيز سكتة دماغية إقفارية عن طريق انسداد الشريان الدماغي الأوسط.
هذا يمنع الدم الغني بالأكسجين من الوصول إلى الدماغ ، مما يضع الخلايا العصبية تحت ضغط شديد.
يتعطل الحاجز الدموي الدماغي ، مما يؤدي إلى حدوث التهاب.
ومع ذلك ، فإن الخلايا العصبية المدربة على RPP تتكيف بشكل أفضل مع ظروف الأكسجين المنخفض ، مما يجعلها أكثر مقاومة للتلف وتحافظ على وظيفتها.
يشير هذا إلى أن RHP يساعد الخلايا العصبية على التكيف ويقلل من تلف الدماغ الناجم عن السكتة الدماغية الإقفارية والحرمان من الأكسجين.
للبدء ، قسم الفئران إلى مجموعتين ، مجموعة RHP ، التي تتلقى تعرضات بنسبة 8٪ و 11٪ أكسجين ، والمجموعة الضابطة ، التي تتعرض بنسبة 21٪ من الأكسجين في وقت واحد. قم بإزالة غطاء المرشح العلوي لكل قفص ، وضع القفص مع زجاجات الطعام والماء سليمة في الغرف المتصلة بخزانات الأكسجين الخاصة بها. أغلق غطاء الغرفة وثبته.
افتح صمام الغاز الرئيسي للخزانات ، واضبط التدفق الأولي لكل غرفة حث على 2 لتر في الدقيقة ، أو LPM. بعد خمس دقائق من التعرض ، قلل معدل التدفق إلى 1 LPM لبقية التعرض. في نهاية التعرض ، قلل التدفق إلى صفر LPM ، وأغلق صمام الغاز للخزانات.
افتح أغطية الغرفة واستبدل الغطاء العلوي للفلتر في كل قفص. ضع الأقفاص في السكن القياسي حتى التعرض التالي لنقص الأكسجين. رش كل حجرة تحريض بمطهر ومزيل للروائح الكريهة بعد كل استخدام.
كشف كل من RHP وفئران التحكم في نفس الوقت من اليوم على مدار أسبوعين من البروتوكول. ثم قم بإجراء انسداد عابر للشريان الدماغي الأوسط ، أو TMCAO ، كما هو موضح في النص.