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微生物学
0 次观看 • 2:18 分钟 • September 26th, 2025
从一个含有多种能够代谢富硫化合物的产硫化氢细菌悬液的平板开始。
加入含有L-半胱氨酸作为硫源的氯化铋溶液,并短暂孵育混合物。
孵育过程中,细菌利用L-半胱氨酸产生硫化氢,硫化氢与铋离子反应生成不溶性的黑色硫化铋沉淀。
该反应使溶液颜色由浅黄色变为黑色,表明有硫化氢生成。
接下来,使用不同浓度的硫氢化钠作为硫化氢标准品进行检测,并加入氯化铋。
这会生成从浅色到深黑色的色谱,代表硫化氢的水平。
现在,利用此梯度直观比较并估测细菌样品中的硫化氢水平,从而实现产硫化氢细菌的快速检测。
在96孔微孔板中,将100微升细菌培养物与100微升新配制的铋溶液混合,在37°C下培养20分钟。每种细菌菌株均需进行三次重复实验。
20 分钟后,观察颜色变化。如果溶液颜色由浅黄色变为黑色,则表明该细菌能够产生硫化氢(H2S)。重复此检测三次。
通过将不同浓度的硫氢化钠与硫化铋溶液混合,测定该方法的灵敏度。最后,通过观察是否生成黑色硫化铋沉淀,确定硫氢根离子和硫离子的存在。根据显色情况,使用从无颜色生成到最深黑色生成的视觉标尺对各孔的颜色进行评分。