测定载抗生素聚合物条的抗菌功效

0 次观看2:19 分钟 • September 26th, 2025

取含有不含抗生素和含抗生素的聚合物条带的注射器。

用具有代谢活性的致病菌培养物填充注射器。

将注射器置于振荡条件下孵育,以确保细菌与培养基均匀接触。

孵育期间,药敏条带中的抗生素扩散至培养基中,抑制细菌生长。

在不含抗生素的试纸条的注射器中,细菌大量增殖。

将每支注射器中的细菌悬液收集到微量离心管中。

将等分试样转移至多孔板中。

加入含有荧光素、荧光素酶和裂解剂的试剂混合物。

振荡孵育以促进细菌裂解,释放包括ATP在内的细胞组分。ATP驱动荧光素酶介导的发光反应。

使用微孔板读数仪记录发光值。

与未暴露于抗生素的培养物相比,暴露于载有抗生素的试纸条的细菌培养物表现出发光强度降低。

这种降低的发光现象证实了载抗生素试纸条的抗菌效果。

将未使用过的和载药的超高分子量聚乙烯(UHMWPE)条置于一个3毫升注射器中。然后通过连接的针头将含有细菌悬液的MHB吸入注射器,直至达到1.5毫升刻度线。

将注射器装置置于摇床培养箱中,分别在六小时及之后每天直至第七天的指定时间点进行培养。每个指定时间点结束后,取出注射器装置,将培养基转移至一个2毫升离心管中。使用100 µL细菌悬液,按照论文中所述方法进行实时微生物活力检测。