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微生物学
0 次观看 • 2:19 分钟 • September 26th, 2025
取含有不含抗生素和含抗生素的聚合物条带的注射器。
用具有代谢活性的致病菌培养物填充注射器。
将注射器置于振荡条件下孵育,以确保细菌与培养基均匀接触。
孵育期间,药敏条带中的抗生素扩散至培养基中,抑制细菌生长。
在不含抗生素的试纸条的注射器中,细菌大量增殖。
将每支注射器中的细菌悬液收集到微量离心管中。
将等分试样转移至多孔板中。
加入含有荧光素、荧光素酶和裂解剂的试剂混合物。
振荡孵育以促进细菌裂解,释放包括ATP在内的细胞组分。ATP驱动荧光素酶介导的发光反应。
使用微孔板读数仪记录发光值。
与未暴露于抗生素的培养物相比,暴露于载有抗生素的试纸条的细菌培养物表现出发光强度降低。
这种降低的发光现象证实了载抗生素试纸条的抗菌效果。
将未使用过的和载药的超高分子量聚乙烯(UHMWPE)条置于一个3毫升注射器中。然后通过连接的针头将含有细菌悬液的MHB吸入注射器,直至达到1.5毫升刻度线。
将注射器装置置于摇床培养箱中,分别在六小时及之后每天直至第七天的指定时间点进行培养。每个指定时间点结束后,取出注射器装置,将培养基转移至一个2毫升离心管中。使用100 µL细菌悬液,按照论文中所述方法进行实时微生物活力检测。