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微生物学
0 次观看 • 2:52 分钟 • November 28th, 2025
取一个含有甘露醇的营养培养基的微孔板。
用产纤维素细菌接种每个孔，并在静置条件下培养。
孵育期间，细菌吸收甘露醇并将其代谢为葡萄糖。
这种葡萄糖被转运至嵌在细菌膜中的纤维素合酶复合体，并聚合形成葡聚糖链。
这些链延伸至细胞外空间，并在其中结晶形成微原纤维。
微原纤维聚集成带状结构，形成三维纳米纤维素基质。
随着纳米纤维素的不断生成，其在气-液界面处逐渐积累，增厚形成凝胶状菌膜，并塑造成孔洞的形状。
收获菌膜，并将其在碱性溶液中孵育以裂解细菌细胞，随后去除残留培养基。
用清水反复冲洗胶膜，以去除残留的碱性溶液。将胶膜保存在水中，防止脱水。随后进行蒸汽灭菌，以确保其无菌状态，便于后续应用。
将2毫升液体培养基转移至24孔组织培养板的每个孔中。用接种针从上一步接种的培养皿中取出两个菌落，放入组织培养板的第一个孔中。对剩余的23个孔重复相同操作。
将组织培养板在 30 摄氏度下孵育七天。可获得总共 24 片 BNC 菌膜，直径为 16 mm，厚度约为 2 至 3 mm。从培养基中收集 BNC 菌膜，并在 200 毫升 1% 氢氧化钠溶液中于 50 摄氏度下灭菌一小时，以彻底去除 G. xylinus 的残留物。
弃去溶液，加入200毫升 freshly prepared 的1%氢氧化钠溶液。重复此步骤一次或直至溶液中的BNC薄膜呈现半透明外观。用纯水冲洗BNC薄膜三次，并将其置于室温下的高纯度水中保存。
确保细菌纤维素膜完全浸没在水中，且任何时候均不得使其干燥。随后，将细菌纤维素膜在121摄氏度下高压灭菌20分钟。