分离含胞内细菌群落的小鼠膀胱上皮细胞

从感染了荧光标记的尿路致病性 E. coli 的小鼠膀胱中刮取膀胱上皮细胞开始。

感染过程中，这些细菌会侵入上皮细胞并形成胞内细菌群落（IBCs），即类似生物膜的结构，可保护其免受宿主免疫防御系统的攻击。

在解剖显微镜下，将IBC识别为局限于单个上皮细胞内的大型荧光聚集体。

使用拉制的玻璃毛细管连接至吸液移液器，组装口控微量移液装置，以分离单个含有 IBC 的上皮细胞。

将毛细管尖端短暂浸入 PBS 中，以减少毛细作用引起的液体吸入。

将毛细管移至选定的荧光上皮细胞附近，施加轻柔负压，吸入含有单个IBC的细胞，避免吸入未感染细胞及细胞外细菌。

使用轻微正压将细胞排出至无菌微量离心管中，以保持细菌活性。

该方法可实现对含有侵袭性乳腺癌细胞（IBC）的上皮细胞进行分离，用于单细胞分析。

当所有细胞都被刮下后，将拉制好的玻璃毛细管未拉细的一端插入吸管管橡胶塞中，并将1毫升移液器吸头的细端紧密地插入管子的另一个开口端。

将2毫升吸液移液管的窄端紧密插入1毫升移液器吸头开口的宽端，并将刮取的细胞悬液置于解剖显微镜下。使用20至40倍放大倍数，将IBC识别为大的荧光聚集体，并将玻璃毛细管的细端浸入一管新鲜的PBS中1秒钟，以减少通过毛细作用吸入的非目标液体体积。

当定位到目标乳腺癌细胞团（IBC）后，缓慢将毛细管的开口端移向该细胞团，并对吸液移液管施加极轻微的负压，以引导IBC进入玻璃毛细管中。随后，将毛细管移至一个空的1.5毫升离心管中，施加轻微的正压，将液滴及IBC排出至管内。