诱导神经前体细胞向星形胶质细胞的分化

取一培养皿，内含接种于包被有细胞外基质蛋白的多孔板上的诱导性神经前体细胞（iNPCs）。

更换为胶质细胞诱导培养基并进行培养。培养基中的生长因子和激素可促进iNPC分化为胶质前体细胞。

每隔一天更换一次培养基以促进细胞增殖。随后，将培养基更换为星形胶质细胞培养基并继续培养。

培养基中的特定营养物质和生长因子可诱导胶质前体细胞分化为星形胶质细胞。

每隔一天更换培养基可促进星形胶质细胞成熟。

当细胞融合度达到约70%时，更换为神经分化培养基，并每隔一天换液一次，持续三周。分化期间不要传代细胞。三周后，细胞应表达神经元标志物TuJ1。

为了获得更成熟的神经元及神经元亚型，可继续分化长达三个月。若要将iNPCs特异性地向胶质细胞系分化，请更换为胶质诱导培养基，其中包含每毫升20纳克的表皮生长因子，以诱导其分化为胶质前体细胞。每隔一天更换一半培养基，补充新鲜培养基，持续约两周。

在此期间，当细胞达到100%汇合度时，应在含有10微摩尔Rho激酶抑制剂的培养基中以1:3比例传代。两周后，当细胞接近汇合时，更换为市售的星形胶质细胞培养基，并继续每两天更换一次培养基，以进一步诱导细胞向星形胶质细胞分化。约七天后，细胞开始表达星形胶质细胞标志物。