获取小鼠海马水平脑切片

0 次观看2:55 分钟 • July 8th, 2025

将小鼠脑半球置于高蔗糖溶液中,用黏合剂将其腹面朝上固定在振动切片机的样品板上。

将样本板转移至切片室。

加入半冻结的高蔗糖溶液,以维持组织的生理状态并固化粘合剂。

提供二氧化碳-氧气混合气体以维持组织氧合。

根据设定的参数,获取初始切片并将其移除。随后,获取水平方向的海马切片。

小心地将这些脑切片转移至含有ACSF的孵育 chamber 中,以进行组织恢复。

水平海马脑片已准备好用于进一步实验。

将两个半球置于新切的背侧,腹侧朝上,并在样品板上滴一滴超级胶水。用移液器吸头将胶水涂抹成较大面积,以容纳两片组织,然后将一条滤纸带接触其中一个半球的腹面。用另一条滤纸带小心地将脑的背侧部分吸干,再将半球背侧朝下放置在样品板的胶水上。

使用两条额外的滤纸条,按照刚刚演示的方法将第二个半球体固定到胶水上,并将样本板放入切片室中。然后迅速但小心地用冰冷的高蔗糖切片溶液冰浆覆盖样本板。为获取脑组织切片,将振动切片机刀片置于半球内侧前方,并升起振动切片机载物台,使刀片与目前朝上的半球腹侧处于同一高度。

使用振动切片机控制装置,将刀片进一步向背侧方向降低600微米,并继续切片,直至前两片组织完全从两个半球分离。获得前两片组织切片后,反转切割方向,再次切片前将刀片再降低300微米。当海马结构变得可见时,使用加宽的塑料巴斯德吸管收集切片,并将其转移至水浴中的恢复室。