建立脑片电生理记录的全细胞电压钳制配置

在电解质溶液中使用带有金属丝电极的记录电极。

将移液管置于固定的脑切片上方。

调节移液管电流以减少背景信号。

使用显微镜定位目标神经元，并将移液管移向该神经元。

施加轻微正压并锁定。

正压会扰动组织表面，表明已接近细胞。

将移液器靠近直至膜上形成凹陷，表明位置正确。

释放正压。

观察到随着细胞与移液管形成封接，电阻增大。

将膜电位稳定在恒定的负电压下。

将微量移液器移开以释放多余压力。

调节移液器的快速和慢速电响应以确保准确性。

施加短暂的负压以击穿细胞，建立直接的电连接。

全细胞电压钳制配置现已准备就绪，可用于电生理记录。

为了获得全细胞记录构型，将记录电极置于脑片上方，然后在电压钳制模式下调整电极电流。对电极施加轻微正压，并锁定旋塞阀。

接下来，选择一个细胞膜完整的健康细胞，并用移液管接近组织。正压应在组织表面引起轻微扰动。缓慢以对角线方向将移液管靠近细胞，直至细胞表面形成一个小凹陷。随后，释放正压锁定。细胞将开始形成封接，电阻将上升至超过1吉欧姆。在电压钳模式下，将细胞钳制在-68毫伏。

随后，将移液管从细胞上斜向略微抽出，以释放多余压力。补偿移液管的快速和慢速电容。通过连接移液管支架的管道施加短暂抽吸，以击穿细胞膜，获得全细胞记录构型。