基于微电极阵列的小鼠脊髓切片神经元网络评估

取一个微电极阵列（MEA）, 将小鼠脊髓切片置于含 aCSF 的孵育槽中，并用加权网固定。

将MEA孔板置于记录系统中。在显微镜下，确保MEA电极与富含中间神经元的浅层背角（SDH）区域实现最大程度的接触。

保持持续的 aCSF 流动以平衡组织。

神经元通过动作电位进行通讯。钠离子内流使膜去极化，随后钾离子外流引起复极化。膜电位短暂地发生超极化，从而阻止新的动作电位产生，直至静息电位恢复。

使用MEA电极记录神经元的自发性电活动。在多个电极上同时出现的信号表明存在由突触连接的神经元网络。

加入钾通道抑制剂以延长去极化，从而提高动作电位频率，并促进整个网络的同步节律性活动。

显示共现信号的电极越多，表明抑制剂介导的同步活动越明显。

开始记录背角活动时，使用装有人工脑脊液的大口径巴斯德移液管将脑片从孵育箱转移至MEA小室，并加入额外的人工脑脊液。

使用精细的短毛画笔将脑片移至60电极记录阵列上方。然后，在组织上放置一个带重物的网，以固定其位置并促进与MEA电极的良好接触。

将MEA放置在记录头的载物台上。使用倒置显微镜检查组织在电极上的位置，确认尽可能多的电极位于浅层背角（DH）下方。确保至少有2至6个电极不与脑片接触。

将相机连接至设备后，拍摄脑片相对于MEA的参考图像，供分析时使用。然后，在记录软件中点击开始 DAQ，并确认所有电极均接收到清晰信号。

接下来，将灌注系统的进液管和出液管连接至已加入人工脑脊液的MEA小室，并启动灌注系统。检查流速，确保出液端流量充足，以防止灌流液溢出。组织平衡5分钟后，记录5分钟的原始基线数据。

将灌注进液管从人工脑脊液切换至4-氨基吡啶溶液，并等待12分钟，使4-氨基吡啶诱导的节律性活动达到稳态。随后，记录5分钟的4-氨基吡啶诱导活动，并准备好进行后续记录，以测试药物作用或检测4-氨基吡啶诱导活动的稳定性。