新生啮齿类动物脑干-脊髓标本的电生理记录

将新生啮齿类动物的脑干-脊髓标本固定在记录室中，并持续灌注含氧人工脑脊液（aCSF）。去除覆盖在标本上的薄层组织。

脑干的神经元网络产生一种节律性电活动，称为吸气爆发，该活动被传递 通过 脊髓第四腹侧神经根（即C4神经根）的运动神经元控制呼吸。

将记录电极置于神经根附近，利用负压吸引使神经根进入电极内，形成封接。

脑干神经元的固有特性引起钠离子内流，导致膜去极化并产生动作电位，随后钾离子外流实现复极化。

随后的超极化会阻止新的动作电位产生，直到钠-钾ATP酶利用ATP恢复膜电位。

动作电位以节律性脉冲的形式传导至神经根。

灌注缺氧的人工脑脊液（aCSF）以阻断ATP生成并损害ATP酶功能，从而延迟动作电位并减少节律性簇状放电。

恢复含氧人工脑脊液后，节律性爆发的次数得以恢复。

在此操作步骤中，将神经组织置于记录室中，腹侧朝上。用固定针固定脊髓的最尾端部分以及脑干的最头端部分。随后，去除覆盖在神经组织表面的薄层蛛网膜组织。注意避免损伤神经组织的软脑膜及血管。接下来，用人工脑脊液（ACSF）填充电极。

使用显微操作器，小心地将电极放置在第四腹根附近。用注射器轻柔地吸住神经根丝。然后，将带有神经根丝的电极贴附于脊髓表面。随后，在常氧条件下至少记录20分钟由神经组织产生的电生理活动，以确定标本的基础参数。

将灌流液从通入碳酰气的ACSF更换为缺氧刺激ACSF，并记录15分钟。随后，将灌流液重新换回标准的通入碳酰气的ACSF，继续记录至少15分钟，然后结束记录。