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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:22 Min. • September 26th, 2025
Beginnen Sie mit einer Schale, die eine filamentöse Cyanobakterienkultur enthält, die über einem kleinen Fenster positioniert ist, das mit einer LED-Halterung in einem dunklen Raum ausgestattet ist.
Die LED beleuchtet die Schale von unten, wodurch eine kleine Lichtzone entsteht.
Während der Inkubation wandern die filamentösen Cyanobakterien in Richtung des beleuchteten Zentrums, was Phototaxis zeigt.
Im Laufe der Zeit wandern die Cyanobakterien und sammeln sich im beleuchteten Zentrum an, wodurch eine sichtbar dichte Bakterienzone entsteht.
Legen Sie nach der Inkubation ein weißes Papier unter die Schale, um den Kontrast zu erhöhen.
Nehmen Sie ein Bild des beleuchteten Bereichs auf und analysieren Sie es mit einer Software.
Zeichnen Sie eine Linie quer durch die Schale, die durch die Mitte der Bakterienzone verläuft, um ein Pixelintensitätsprofil zu erstellen.
Vergleichen Sie die durchschnittliche Pixelintensität außerhalb und innerhalb der Bakterienzone.
Zeichnen Sie als Nächstes eine Linie mit der maximalen Intensität innerhalb des zentralen Bereichs, um den Durchmesser der Bakterienzone zu bestimmen, die cyanobakterielle Phototaxis darstellt.
Bereiten Sie LED-Halterungen vor, an denen die Fünf-Millimeter-LEDs montiert sind, um eine Fläche von 20 Millimetern im Quadrat von unten nach oben zu bestrahlen. Messen und stellen Sie die LED-Intensitäten ein. Stellen Sie sicher, dass sich die gesamte Umgebung in einem dunklen Raum oder einem geschlossenen, dunklen Behälter befindet.
Geben Sie acht Milliliter des Mediums, das P. lacuna enthält, in eine sechs Zentimeter große Petrischale, verschließen Sie die Petrischale mit dem Deckel und stellen Sie sie so auf eine LED-Halterung, dass sich die LED in der Mitte der Petrischale befindet. Nehmen Sie in der Regel nach zwei Tagen ein Bild der Petrischale mit einer Smartphone-Kamera auf, die direkt auf die Position der Lichtbehandlung gerichtet ist. Verwenden Sie eine Halterung und ein weißes Blatt als Hintergrund, um für jedes Bild den gleichen Abstand und die gleichen Lichtverhältnisse zu gewährleisten.
Öffnen Sie die ImageJ-Software, klicken Sie auf Datei, Öffnen und wählen Sie die Datei aus. Klicken Sie dann auf Enter. Wählen Sie die gerade Taste und drücken Sie die linke Maustaste, um eine Linie von einem Ende der Petrischale zum gegenüberliegenden Ende zu ziehen.
Stellen Sie sicher, dass die Linie durch die Mitte des Filamentkreises verläuft. Klicken Sie auf Analysieren und Messen, um die Länge der Petrischale zu sehen. Klicken Sie dann im Menü ImageJ auf Profil analysieren und plotten.
Schätzen Sie einen Durchschnittswert für die Pixelintensität außerhalb des Kreises und einen anderen Durchschnittswert für die Pixelintensität innerhalb des Kreises. Zeigen Sie mit der Maus auf die Y-Position zwischen diesen Werten, um die X-Werte beider Seiten des Kreises zu schätzen. Notieren Sie sich beide Werte und berechnen Sie die Differenz.
Wählen Sie dann die gerade Schaltfläche aus und zeichnen Sie eine Linie mit dem mittleren Maximalwert der Pixelintensität. Klicken Sie abschließend auf Analysieren und dann auf Messen, um die Länge des inneren Zellkreises zu erhalten.