Durchführung der intratrachealen bakteriellen Verabreichung in einem Mausmodell

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus in Rückenlage, deren Hals rasiert ist.

Desinfizieren Sie die rasierte Stelle.

Machen Sie einen Schnitt im Nacken und präparieren Sie dann den Muskel, um die Luftröhre freizulegen, die Atemwege, die zu den unteren Atemwegen, einschließlich der Lunge, führen.

Nehmen Sie eine mit lungenpathogenen Bakterien vorbeladene Spritze, die zwischen zwei kleinen Luftmengen positioniert ist.

Führen Sie die Nadel in die Luftröhre ein und injizieren Sie das erste Luftvolumen, um die Luftröhre zu reinigen.

Geben Sie dann das bakterielle Inokulum ab, gefolgt von dem zweiten Luftvolumen, um die Bakterienverteilung tiefer in die unteren Atemwege zu verbessern.

Halten Sie die Maus kurz senkrecht, um eine gleichmäßige Verteilung der Bakterien in den unteren Atemwegen zu fördern.

Versiegeln Sie den Schnitt mit Gewebekleber und lassen Sie die Maus sich erholen.

Diese Methode ermöglicht die direkte Abgabe von Krankheitserregern in die unteren Atemwege unter Umgehung der Barrieren der oberen Atemwege.

Beginnen Sie mit der Betäubung der Maus und überprüfen Sie, ob sie ausreichend betäubt ist, indem Sie die Zehen zusammendrücken.

Positionieren Sie dann die Maus in Rückenlage und rasieren Sie den ventralen Bereich des Halses. Desinfizieren Sie die exponierte Haut. Heben Sie nun die Haut des oberen ventralen Teils des Halses mit einer Rattenzahnzange an und machen Sie mit einem Skalpell einen Einschnitt von einem halben bis einem Zentimeter über dem Thymus.

Trennen Sie dann vorsichtig den Muskel, um die Luftröhre freizulegen. Injizieren Sie langsam 50 Mikroliter Luft in die Luftröhre, gefolgt von 50 Mikrolitern vorbereitetem NTHi, gefolgt von weiteren 50 Mikrolitern Luft.

Halten Sie das Tier nach der Injektion etwa eine Minute lang senkrecht. Dann verschließen Sie den Schnitt mit Gewebekleber und halten Sie die Maus seitlich liegend und warm für ca. 10 Minuten.