Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiology
0 visualizaciones • 2:22 min. • October 30th, 2025
Comience con un ratón anestesiado en posición supina, con el cuello afeitado.
Desinfecte el área afeitada.
Haga una incisión en el cuello, luego diseccione el músculo para exponer la tráquea, las vías respiratorias que conducen al tracto respiratorio inferior, incluidos los pulmones.
Tome una jeringa precargada con bacterias patógenas pulmonares, colocada entre dos pequeños volúmenes de aire.
Inserte la aguja en la tráquea e inyecte el primer volumen de aire para limpiar la tráquea.
A continuación, administre el inóculo bacteriano, seguido del segundo volumen de aire para mejorar la dispersión bacteriana más profundamente en el tracto respiratorio inferior.
Sostenga brevemente el mouse verticalmente para promover una distribución uniforme de bacterias en todo el tracto respiratorio inferior.
Selle la incisión con adhesivo tisular y deje que el ratón se recupere.
Este método permite la administración directa de patógenos en el tracto respiratorio inferior, sin pasar por las barreras de las vías respiratorias superiores.
Comience anestesiando al ratón y verificando que esté adecuadamente anestesiado con un pellizco en el dedo del pie.
Luego, coloque el ratón en decúbito supino y afeite el área ventral del cuello. Desinfectar la piel expuesta. Ahora, levante la piel de la parte ventral superior del cuello con pinzas de dientes de rata y, con un bisturí, haga una incisión de medio a un centímetro por encima del timo.
Luego, separe con cuidado el músculo para exponer la tráquea. En la tráquea, inyecte lentamente 50 microlitros de aire, seguidos de 50 microlitros de NTHi preparado, seguidos de otros 50 microlitros de aire.
Después de la inyección, mantenga al animal en posición vertical durante aproximadamente un minuto. Luego, cierre la incisión con adhesivo tisular y mantenga el ratón recostado lateralmente y caliente durante unos 10 minutos.