Name: Un sistema microfisiológico cardíaco para estudiar la propagación de Ca2+ a través de la estimulación óptica no genética (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-21T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Aprende a integrar métodos de fotoestimulación basados en materiales en modelos microfisiológicos cardíacos in vitro. Esta técnica no genética permite controlar la actividad celular con precisión para estudios de fisiología cardíaca y cribado de fármacos.

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<ol><li>Di Maria, F., Lodola, F., Zucchetti, E., Benfenati, F., Lanzani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+artificial+light+actuators+in+living+systems%3A+from+planar+to+nanostructured+interfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Soc+Rev%22%5BJournal%5D)">The evolution of artificial light actuators in living systems: from planar to nanostructured interfaces.</a> Chem Soc Rev. 47 (13), 4757-4780 (2018).</li>
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<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nongenetic+optical+neuromodulation+with+silicon-based+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Nongenetic optical neuromodulation with silicon-based materials.</a> Nat Protoc. 14 (5), 1339-1376 (2019).</li>
<li>Rotenberg, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Living+myofibroblast-silicon+composites+for+probing+electrical+coupling+in+cardiac+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Living myofibroblast-silicon composites for probing electrical coupling in cardiac systems.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 116 (45), 22531-22539 (2019).</li>
<li>DiFrancesco, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+firing+modulation+by+a+membrane-targeted+photoswitch%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Neuronal firing modulation by a membrane-targeted photoswitch.</a> Nat Nanotechnol. 15 (4), 296-306 (2020).</li>
<li>Paternò, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+environment+enables+ultrafast+isomerization+of+amphiphilic+azobenzene%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci%22%5BJournal%5D)">Membrane environment enables ultrafast isomerization of amphiphilic azobenzene.</a> Adv Sci. 7 (8), 1903241(2020).</li>
<li>Vurro, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+design+of+amphiphilic+plasma+membrane-targeted+azobenzenes+for+nongenetic+optical+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mater%22%5BJournal%5D)">Molecular design of amphiphilic plasma membrane-targeted azobenzenes for nongenetic optical stimulation.</a> Front Mater. 7, 631567(2021).</li>
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<li>Park, S. -J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+pathogenesis+of+catecholaminergic+polymorphic+ventricular+tachycardia+from+engineered+human+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Insights into the pathogenesis of catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia from engineered human heart tissue.</a> Circulation. 140 (5), 390-404 (2019).</li>
<li>Lee, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+autonomously+swimming+biohybrid+fish+designed+with+human+cardiac+biophysics%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An autonomously swimming biohybrid fish designed with human cardiac biophysics.</a> Science. 375 (6581), 639-647 (2022).</li>
<li>Lian, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+cardiomyocyte+differentiation+from+human+pluripotent+stem+cells+by+modulating+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signaling+under+fully+defined+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Directed cardiomyocyte differentiation from human pluripotent stem cells by modulating Wnt/β-catenin signaling under fully defined conditions.</a> Nat Protoc. 8 (1), 162-175 (2013).</li>
<li>Prondzynski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+reproducible+generation+of+human+iPSC-derived+cardiomyocytes+and+cardiac+organoids+in+stirred+suspension+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Efficient and reproducible generation of human iPSC-derived cardiomyocytes and cardiac organoids in stirred suspension systems.</a> Nat Commun. 15 (1), 5929(2024).</li>
<li>Pasqualini, F. S., Sheehy, S. P., Agarwal, A., Aratyn-Schaus, Y., Parker, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+phenotyping+of+stem+cell-derived+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Structural phenotyping of stem cell-derived cardiomyocytes.</a> Stem Cell Rep. 4 (3), 340-347 (2015).</li>
<li>Fonck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+aging+on+elastin+functionality+in+human+cerebral+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Effect of aging on elastin functionality in human cerebral arteries.</a> Stroke. 40 (7), 2552-2556 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>alamarReactivo de viabilidad celular azul</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>DAL1025</td><td>Ensayo de viabilidad celular</td></tr><tr><td>B-27 Suplemento, sin insulina</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A1895601</td><td>Para cultivo celular</td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9056-50G</td><td>Para tinción celular</td></tr><tr><td>Software BrainVision Analyzer&nbsp;</td><td>Brain Products</td><td>https://www.brainproducts.com/downloads/analyzer/</td> <td>Exportación y manejo de datos</td></tr><tr><td>BTS</td><td>Sigma</td><td>203895-5MG</td><td></td></tr><tr><td>CHIR99021</td><td>Stem Cell Technologies</td><td>72054</td><td></td></tr><tr><td>Lámina acrílica transparente resistente a los arañazos y a los rayos UV, 12" x 12" x 0,01 pulgadas</td><td>McMaster Carr</td><td>4076N11</td><td>Fabricación de chips de tejido</td></tr><tr><td>Colagenasa tipo II&nbsp;</td><td>Worthington</td><td>CLS-2 / LS004176</td><td></td></tr><tr><td>DNase II</td><td>VWR</td><td>89346-540</td><td></td></tr><tr><td>Essential 8 Medium&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific A1517001</td><td></td><td>para cultivo celular</td></tr><tr><td>Fibronectina</td><td>VWR</td><td>47743-654</td><td></td></tr><tr><td>Gelatina de recubrimiento de piel porcina fuerza de gel 175 Tipo A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G2625-100G Fabricación de</td><td>chips de tejido</td></tr><tr><td>Geltrex Libre de LDEV, calificado por hESC, factor de crecimiento reducido Matriz de membrana basal</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Recubrimiento A1413302 HBSS&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>HEPES (1 m)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342&nbsp;</td><td>Life technologies</td><td>H1399</td><td>Para tinción celular</td></tr><tr><td>Solución de insulina humana</td><td>Sigma Aldrich</td><td>I9278-5ML</td><td></td></tr><tr><td>IWR-1-endo</td><td>Stem Cell Technologies</td><td>72564</td><td></td></tr><tr><td>Paraformadehído 16% Solución acuosa (PFA)</td><td>VWR</td><td>100503-917</td><td>Para tinción</td>celular</tr><tr><td>PBS, estéril, 500 mL</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010049</td><td>Fabricación de chips de tejido</td></tr><tr><td>solución salina tamponada con fosfato</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010049</td><td></td></tr><tr><td>Pluronic F-127 (solución al 20% en DMSO)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>P3000MP</td><td>tensioactivo no iónico</td></tr><tr><td>Inhibidor de ROCK Y-27632</td><td>Stem Cell Technologies</td><td>72304</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medio, Suplemento GlutaMAX</td><td>Thermo Fisher Scientific 61870127</td><td></td><td>Para cultivo celular</td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medio, sin rojo fenol</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>11835030 Mapeo óptico</td></tr><tr><td>Solución Versene Thermo</td><td>Fisher Scientific</td><td>15040066</td><td>agente quelante</td></tr><tr><td>VWR Cinta de etiquetado de laboratorio de uso general VWR</td><td>VWR</td><td>89098-058 Fabricación de</td><td>chips de tejido</td></tr><tr><td>X-Rhod-1 AM</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>X14210</td><td>Mapeo óptico</td></tr></tbody></table>

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A Cardiac Microphysiological System for Studying Ca2+ Propagation via Non-genetic Optical Stimulation

Se desarrolló e implementó un proceso de varios pasos para la fabricación de tejido cardíaco laminar diseñado utilizando una combinación de técnicas de modelado láser, moldeo de gelatina y siembra de células. Originalmente establecida por McCain et al.22 y Lee et al.24, esta técnica fue reimplementada, siguiendo sus protocolos para construir los microtejidos laminares diseñados. El proceso integra patrones precisos basados en láser para la guía estructural, gelatina como ma...

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Bioengineering

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