Encyclopédie des expériences JoVE
Neuroscience
0 vues • 1:24 min • August 7th, 2025
Prenez des constructions musculaires squelettiques bio-imprimées.
Ces constructions contiennent des piliers d’hydrogel de fibrine avec des fibres musculaires et des microsphères intégrées.
La microsphère est une structure polymère poreuse renfermant des facteurs neurotrophiques.
Prenez des ganglions de la racine dorsale isolés d’embryons de poussin.
Placez un ganglion sur chaque construction et incuberez.
Les facteurs neurotrophiques sont libérés des microsphères à une concentration physiologique contrôlée, facilitant la germination des projections des neurones appelées névrites.
Ajoutez un fixateur pour fixer les constructions.
Laver avec un tampon et ajouter une solution bloquante pour éviter la liaison d’anticorps non spécifiques.
Incuber avec les anticorps primaires, qui se lient spécifiquement au neurite.
Rincer avec un tampon pour éliminer les anticorps non liés.
Ajoutez des anticorps secondaires marqués par fluorescence qui se lient aux anticorps primaires.
Laver avec un tampon pour éliminer l’excès d’anticorps.
Montez la construction à l’aide d’un support de montage contenant un colorant nucléaire et une lamelle.
Sous un microscope confocal, visualisez la croissance des neurites.