Réalisation d’une administration bactérienne intratrachéale dans un modèle de souris

Commencez avec une souris anesthésiée en position couchée, le cou rasé.

Désinfectez la zone rasée.

Faites une incision dans le cou, puis disséquez le muscle pour exposer la trachée, la voie respiratoire menant aux voies respiratoires inférieures, y compris les poumons.

Prenez une seringue préchargée de bactéries pathogènes pour les poumons, positionnée entre deux petits volumes d’air.

Insérez l’aiguille dans la trachée et injectez le premier volume d’air pour dégager la trachée.

Ensuite, administrez l’inoculum bactérien, suivi du deuxième volume d’air pour améliorer la dispersion bactérienne plus profondément dans les voies respiratoires inférieures.

Tenez brièvement la souris verticalement pour favoriser une répartition uniforme des bactéries dans les voies respiratoires inférieures.

Scellez l’incision avec un adhésif tissulaire et laissez la souris récupérer.

Cette méthode permet l’administration directe d’agents pathogènes dans les voies respiratoires inférieures, en contournant les barrières des voies respiratoires supérieures.

Commencez par anesthésier la souris et vérifiez qu’elle est correctement anesthésiée à l’aide d’un pincement des orteils.

Ensuite, positionnez la souris en décubitus dorsal et rasez la zone ventrale du cou. Désinfectez la peau exposée. Maintenant, soulevez la peau de la partie ventrale supérieure du cou avec une pince à dents de rat et, à l’aide d’un scalpel, faites une incision d’un demi-centimètre à un centimètre au-dessus du thymus.

Ensuite, séparez soigneusement le muscle pour exposer la trachée. Dans la trachée, injectez lentement 50 microlitres d’air, suivis de 50 microlitres de NTHi préparés, suivis d’un autre 50 microlitres d’air.

Après l’injection, maintenez l’animal à la verticale pendant environ une minute. Ensuite, fermez l’incision avec un adhésif tissulaire et gardez la souris allongée latéralement et au chaud pendant environ 10 minutes.