Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiology
0 vues • 2:34 min • November 28th, 2025
Commencez par des sections intestinales colorées à l’hématoxyline et à l’éosine provenant de rats soumis à la chaleur, l’une prétraitée oralement avec tampon en témoin, et l’autre avec une suspension de Bacillus subtilis .
Le stress thermique endommage les protéines des jonctions étroites intestinales, entraînant un raccourcissement des villosités et un amincissement de la muqueuse.
Le pré-traitement avec la bactérie favorise la libération de molécules de signalisation qui stabilisent les protéines de jonction serrée, préservant la hauteur des villosités et l’épaisseur de la muqueuse.
Observez les sections sous le microscope optique haute résolution pour identifier les différences de hauteur des villosités.
Ensuite, placez une goutte de sang frais de chaque rat sur des lames en verre et couvrez avec des couvertures de couverture.
Le stress thermique déstabilise les membranes érythrocytaires, libérant des microvésicules dans la circulation sanguine.
Les bactéries réduisent le stress oxydatif systémique, stabilisant les membranes érythrocytaires et minimisant la vésiculation.
Observez les échantillons de sang au microscope optique haute résolution pour évaluer les différences de vésiculation.
La préservation de la hauteur des villosités dans la section intestinale et moins de microvésicules dans le sang confirment l’effet protecteur des bactéries sous stress thermique.
Après avoir préparé et coloré les sections de l’intestin grêle selon le protocole textuel, utilisez un microscope haute résolution pour mesurer les villosités intestinales et l’épaisseur totale de la muqueuse. Analysez au moins quatre échantillons de chaque rat et effectuez au moins 20 mesures sur chaque échantillon.
Pour réaliser une microscopie optique haute résolution des échantillons de sang, utilisez la plateforme d’isolation des vibrations comme base pour le système de microscope avec une caméra vidéo et un ordinateur afin d’enregistrer des images en direct. Après avoir calibré les images de test selon le protocole textuel, placez sept microlitres de sang fraîchement prélevé de chaque rat sur une lame en verre et ajoutez une gaine de protection. Ensuite, photographiez et enregistrez dix images de 72 par 53,3 micromètres carrés dans chaque échantillon.
Enfin, en utilisant des logiciels fournissant des images optiques haute résolution en vue directe en temps réel, mesurez la concentration des vésicules.