Encyclopédie des expériences JoVE
Microbiology
0 vues • 2:10 min • November 28th, 2025
Inoculez une culture contenant à la fois des espèces de Salmonella et non Salmonella dans un milieu à sélénite cystine, puis incubez.
La sélénite inhibe la croissance des bactéries sensibles au sélénium en perturbant leurs processus métaboliques.
Cependant, les bactéries tolérantes au sélénium, y compris Salmonella, peuvent métaboliser la sélénite et se développer.
Tracez la culture sur le lysine de xylose désoxycholate ou l’agar XLD, puis incubez.
La salmonelle réduit le thiosulfate de sodium dans l’agar XLD en sulfure d’hydrogène, qui réagit avec les ions ferriques du milieu pour former du sulfure de fer noir, produisant des colonies au centre noir.
En revanche, les espèces non-Salmonella qui ne produisent pas de sulfure d’hydrogène forment des colonies sans centres noirs, permettant une différenciation visuelle de Salmonella.
Sélectionnez une colonie centrée en noir et faites-la strier sur l’agar chromogénique Salmonella pour une plus grande spécificité.
L’agar chromogénique contient des substrats enzymatiques spécifiques à Salmonella liés aux chromophores.
Les enzymes Salmonella clivent ces substrats, libérant les chromophores et formant des colonies pigmentées.
Sélectionnez ces colonies pour une analyse plus approfondie.
Ajoutez 100 microlitres de culture pré-enrichissement à cinq millilitres de milieu cristallin de sélénite. Ensuite, incubez la culture à 36 degrés Celsius pendant 18 à 24 heures. Ensuite, prenez une boucle de culture et étalez-la sur une plaque.
Ensuite, couver la plaque à 36 degrés Celsius pendant 18 à 24 heures. Après l’incubation, sélectionnez les colonies suspectes et transférez-les sur une plaque. Incubez la plaque à 36 degrés Celsius pendant 18 à 24 heures.