Encyclopédie des expériences JoVE
Biological Techniques
0 vues • 2:19 min • July 8th, 2025
La cellulose est un polymère non ramifié d’unités β-glucose liées par une liaison β-1→4 et disposées parallèlement via des liaisons hydrogène intermoléculaires.
La cellulose est le principal composant structurel de la paroi cellulaire végétale, fournissant forme et rigidité aux cellules et facilitant la croissance et le développement des plantes. La proportion de cellulose dans la paroi cellulaire varie considérablement dans la plante, selon le type de cellule et le stade de croissance.
Pour visualiser le dépôt de cellulose dans la tige, prenez des coupes transversales minces de sections de tige incrustées d’agarose.
Ajoutez un colorant fluorescent rouge Congo et incubez les sections.
Les molécules rouge Congo pénètrent dans la paroi cellulaire et forment des liaisons hydrogène avec les groupes hydroxyles de la cellulose, s’adsorbant ainsi sur le polymère. Cela donne une couleur rouge à l’épiderme, au cortex et à la moelle.
Les molécules de colorant diffusent également dans les parois cellulaires complexes du xylème et des fibres interfasciculaires, traversant la barrière rigide de lignine, conférant ainsi une couleur rouge à ces tissus également.
Maintenant, rincez les sections à l’eau pour enlever l’excès de tache. Transférez les coupes sur une lame de microscope et placez une lamelle.
Lorsqu’ils sont visualisés au microscope à fluorescence, l’épiderme, le cortex, la moelle centrale, le xylème et les fibres interfasciculaires apparaissent rouges, correspondant à leur teneur en cellulose.
Pour la coloration Congo Red, transférez les sections de tige dans un tube de microcentrifugation et ajoutez 1 millilitre de solution Congo Red à 0,5 %. Pipetez doucement la solution à 0,5 % de rouge Congo de haut en bas, sans déranger les sections, avant d’incuber et de laver les sections comme décrit dans le protocole de texte. Pipetez doucement les sections dans une pointe de pipette coupée, puis sur une lame de microscope, puis couvrez-les d’une lamelle. Observez les échantillons sur la lame de microscope sous excitation de lumière bleue à l’aide d’un filtre d’émission de 560 nanomètres.