Encyclopédie des expériences JoVE
Neuroscience
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Commençons avec un rat immobilisé et anesthésié avec une microélectrode de charbon actif implantée dans le noyau accumbens ou la région NAc et un fil de référence dans l’hémisphère gauche.
Ces électrodes sont reliées à un potentiostat, qui mesure les signaux électriques générés par la dopamine.
Une électrode stimulante avec une canule guide est implantée dans l’aire tegmentale ventrale ou VTA, ciblant les neurones dopaminergiques qui se projettent dans la région NAc.
Appliquez des impulsions électriques via l’électrode de stimulation qui activent les neurones VTA, libérant de la dopamine, un messager chimique, dans la région NAc.
Dans la région NAc, la dopamine interagit avec l’électrode de carbone et subit une oxydation et une réduction, générant des signaux électriques de base.
Insérez une canule interne dans la canule guide pour perfuser un activateur ou un inhibiteur.
Le médicament activateur stimule les neurones VTA, augmentant la libération de dopamine et élevant les signaux électriques.
En revanche, le médicament inhibiteur diminue le signal électrique en empêchant la libération de dopamine.
Stimulez l’animal toutes les trois minutes pendant 20 à 30 minutes. Après avoir obtenu une ligne de base stable, abaissez doucement la canule interne à la main dans la canule de guidage, pré-ajustée dans le stimulateur bipolaire, et obtenez deux à trois enregistrements de base supplémentaires pour confirmer que l’insertion de la canule n’a pas provoqué de changement dans le signal évoqué.
Une fois qu’une réponse de base a été établie, utilisez un pousse-seringue dans une microseringue pour injecter 0,5 microlitre de la solution médicamenteuse d’intérêt dans l’ATV sur une période de deux minutes. Après la perfusion, laissez la canule interne en place pendant au moins une minute avant de la retirer, en continuant à enregistrer la réponse toutes les trois minutes pour mesurer les effets post-perfusion.