Encyclopédie des expériences JoVE
Neuroscience
0 vues • 2:58 min • August 7th, 2025
Prenez une micro-aiguille de quartz avec des trous personnalisés, attachée à une seringue remplie d’eau et connectée à une micropompe pour contrôler le taux de livraison.
Prenez un rat sécurisé et anesthésié avec le site d’injection exposé.
Positionnez la micro-aiguille et placez un film de paraffine en dessous. Mettez une goutte de la solution d’injection dessus.
Rétractez l’eau pour créer une bulle d’air, puis abaissez la micro-aiguille pour aspirer la solution.
Laisser se former une goutte, en assurant un passage dégagé.
Utilisez une aiguille pointue pour percer la membrane du cerveau.
Insérez la micro-aiguille tout en étant réglée à une faible vitesse de distribution pour éviter la pénétration de fragments de tissu dans l’aiguille.
Une fois positionné, allez légèrement plus profondément. Arrêtez la livraison et relevez-la à nouveau pour éviter le reflux.
Commencez la livraison avec une vitesse accrue. Les trous dans l’aiguille assurent une répartition optimale de la solution injectée.
Prévoyez suffisamment de temps avant de retirer l’aiguille pour faciliter la diffusion.
Coupez un petit morceau de film plastique de paraffine et placez-le sur le crâne. À l’aide de la pipette de 10 microlitres, faites une goutte de la solution à appliquer sur le film de paraffine plastique. Arrêtez la pompe. Récupérez légèrement le poussoir de la pompe, et créez une petite bulle d’air dans le capillaire en tirant doucement sur le piston de la seringue de micro-injection.
Abaissez la pointe de l’aiguille jusqu’à ce qu’elle atteigne la goutte. Prélevez l’échantillon en tirant très lentement sur le piston de la seringue de micro-injection, en évitant toute formation de bulles. Replacez le poussoir de pompe en contact avec le piston et allumez la pompe à un débit de 0,3 microlitre par minute.
Attendez ensuite la formation d’une goutte avant de passer à l’étape suivante. Ensuite, réduisez le débit à 0,1 microlitre par minute. Entaillez la dure-mère avec une aiguille à pointe biseautée en acier inoxydable et abaissez lentement l’aiguille pour qu’elle pénètre dans le tissu cérébral. Lorsque la position souhaitée est atteinte, descendez de 0,1 millimètre supplémentaire, puis arrêtez la pompe.
Soulevez le bras stéréostatique de 0,1 millimètre et redémarrez la pompe à 0,3 microlitre par minute. Après cela, démarrez la minuterie et l’injection. Surveillez le mouvement de la bulle pendant l’injection. À la fin, arrêtez la pompe et attendez cinq minutes avant de récupérer lentement l’aiguille.