Name: Multi-פרמטרית Perifusion איילט מערכת בתוך התקן Perifusion Microfluidic (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-26T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: למדו מערכת פריפוזיה מיקרופלואידית לבדיקת הפרשת אינסולין דינמית מאיי לנקראת עכברים. השיטה מאפשרת הדמיית סידן ופוטנציאל מיטוכונדרי בזמן אמת לחקר תפקוד לבלב ומחלות מטבוליות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי AAUW הבינלאומי המילגה כדי Adeola Adewola, NIH / NCRR (U42RR023245) על חוזה Oberholzer, והפרויקט סוכרת שיקגו.

א Microfabrication של המכשיר microfluidic 3-שכבת perifusion ובכן התחתונה מאסטר Protocol (150 מיקרומטר בארות עמוקים) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את רקיק באמצעות סכין גילוח במידת הצורך. ניקוי עם אצטון, מתנול, ו IPA. בצע טיפול פלזמה ב 50 וואט במשך 30 s. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספין SU8-100 @ 2000 סל"ד. [שלב 1: 500 סל"ד, 10 שניות, 100 סל"ד / s, שלב 2: 2000 סל"ד, 30 שניות, 300 סל"ד / s]. [הערה: לא להחזיק את רקיק עם פינצטה לאחר ספינינג SU8] </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפות Soft רקיק על 65 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות ו - ב 95 מעלות צלזיוס למשך 50 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רקיק הוא נחשף לאור UV באמצעות מסכה הרצוי. מנה עבור גובה 150 מיקרומטר הוא 650 mJ / 2 ס"מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשיפה הודעה לאפות את רקיק ב 65 ° C ו - 1 דקות ב 95 מעלות צלזיוס למשך 12 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיתוח ב רקיק מפתח SU8 במשך 15 דקות. </li></ol> מאסטר פרוטוקול microchannel (500 מיקרומטר בארות עמוקים) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את רקיק באמצעות סכין גילוח במידת הצורך. ניקוי עם אצטון, מתנול, ו IPA. בצע טיפול פלזמה ב 50 וואט במשך 30 s. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספין SU8-2150 @ 1000 סל"ד. [שלב 1: 500 סל"ד, 10 שניות, 100 סל"ד / s, שלב 2: 1000 סל"ד, 30 שניות, 300 סל"ד / s]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפות Soft רקיק על 65 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות ו - ב 95 מעלות צלזיוס למשך 2 שעות ו 30 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רקיק הוא נחשף לאור UV באמצעות מסכה הרצוי. מינון חשיפה עבור גובה 650 מיקרומטר הוא 685 mJ / 2 ס"מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשיפה הודעה לאפות את רקיק ב 65 מעלות צלזיוס למשך 5 דק 'ו ב 95 מעלות צלזיוס למשך 35 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פיתוח ב רקיק מפתח SU8 20-30 דקות. </li></ol> PDMS הכנה פתרון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Polydimethylsiloxane (PDMS) פתרון מוכן ביסודיות על ידי ערבוב 10 חלקים אלסטומר סיליקון עם חלק 1 של סוכן ריפוי של ערכת Sylgard תקן 184. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בועות שנוצרו בתמיסה PDMS במהלך תהליך ערבוב מוסרים באמצעות ייבוש ואקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בועה נטולת הפתרון PDMS הוא חילק לאט אל SU8 אדונים צלחת פטרי ריק עבור השכבה השלישית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הטמפרטורה של הפלטה החשמלית מוגדר 75 ° C ו PDMS נירפאים בטמפרטורה זו למשך 2 שעות </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתחי הכניסה, שקעי ובארות החליפין חבט החוצה באמצעות אגרופן חור בגודל המתאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שכבות מחוברים יחד בשקופית זכוכית (0.1 מ"מ גודל) באמצעות מכשיר פלזמה כף יד. </li></ol> ב ניסויית ההתקנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתנול תזרים 70% באמצעות מכשיר המיקרו לעקר. תזרים די מים כדי לשטוף את אתנול. Perfuse 50 מ"ל של BSA 0.5% דרך המכשיר כדי למנוע ספיחה לא ספציפית של אינסולין על הקירות microchannel. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכבש גלוקוז שיפוע והדרגות אחרים הקשורים שנוצר על ידי תוכנת LabVIEW כי מתקשר עם המזרק משאבות נבדקו כדי לוודא הדרגתיים הם יציבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 25-30 איים עכברים הודגרו עם Fura-2/AM 5 מיקרומטר (אינדיקטור סידן, בדיקות מולקולריות, CA) ו - 2.5 מיקרומטר Rhodamine 123 (Rh123, מחוון המיטוכונדריה הפוטנציאלים, Sigma, MO) למשך 30 דקות ב 37 מעלות קרבס-Ringer חיץ (KRB) המכיל 2 גלוקוז mM </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איים העכברים הם pipetted בזהירות דרך נמל כניסת למכשיר perifusion microfluidic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשת microfluidic לאחר מכן ההתקנה על ידי חיבור אל כניסת משאבות מזרק באמצעות צינורות Tygon ו-Y מחבר ולשקע לאספן חלק. המכשיר יושב על שלב החימום (37 ° C) על המיקרוסקופ ואת צינורות כניסת מחומם על פלטה חמה כדי לשמור על הטמפרטורה של החדר פתרון בשעה 37 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לאחר ההתקנה, איים העכברים הם perifused עם KRB המכיל גלוקוז 2 מ"מ עבור 10 דקות ולאחר מכן כבש גלוקוז (2mm 25mm) עבור 25 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זמן לשגות תמונות שנאספו ונותחו כל זה 15 על ידי תוכנת SimplePCI. Perifusate נאסף גם כל דקה באמצעות אספן חלק לנתח את הפרשת האינסולין באמצעות ערכת ELISA. </li></ol> נציג תוצאות איים עכבר היו perifused עם שיפוע ליניארי של גלוקוז 2-25 מ"מ. כפי שניתן לראות בתרשים 1, זרם סידן הפרשת אינסולין מופעלות לאחר כ 13 דקות של perifusion, המתאים גלוקוז 6 מ"מ. השינויים הפוטנציאלים מיטוכונדריאלי נתפסים מוקדם כצפוי, בערך 11 דקות. מידע זה מדגים את היתרון של שימוש ברשת microfluidic לאפיין איון הפיזיולוגיה. <img src="/files/ftp_upload/1649/1649fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. התגובות הפיזיולוגיות כדי איון גירוי התא.

<ol><li>Mohammed, J. S., Wang, Y., Harvat, T. A., Oberholzer, J., Eddington, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+device+for+multimodal+characterization+of+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Microfluidic device for multimodal characterization of pancreatic islets.</a> Lab Chip. 9, 97-106 (2009).</li>
</ol>

מסורתית perifusion איון מערכות (macroscale ו microscale) יש מגבלות כולל המורכב של הגדרת העיצוב, דרישות טכניות גבוהות, קושי ליצור למשתמש שנקבעו הדרגתיים כימיים במערכת. מערכת perifusion microfluidic המתואר כאן מתגבר על המגבלות האלה עם גיאומטריה פשוטה של ​​עיצוב ייצור. חשוב מכך, מערכת זו יכולה להיות משולבת עם גישה דימות פלואורסצנטי המספקים ככלי ייחודי ללמוד איון הפיזיולוגיה. מערכת הפגינו עם יחס אות לרעש גבוה של המרחב וזמן ברזולוציה של האותות הללו פלואורסצנטי. מכשיר אב הטיפוס הנוכחי ג...

<table><tbody><tr><td>מזרקים של 60 מ"ל</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צבע הפלואורסצנציה Fura-2</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צבע הפלואורסצנציה Rhodamine123</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>גלוקוז</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אלבומין משרת בקר</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>30&quot; צינורות סיליקון</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16 x 1/8 אינץ'</td></tr><tr><td>מבחנות Eppendorf בנפח 1.5 מ"ל</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחברי Y</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221; &amp;amp; 4 מ"מ</td></tr><tr><td>מחברי מזרקים</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>פקק לוּאֶר (Luer) נקבה 1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>מחברים ישרים</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>מחבר זווית</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>1/16&amp;#8221;</td></tr><tr><td>משאבת מזרקים של Havard</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכשיר פריפוזיה (Perifusion)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פלטה מחוממת</td><td>PMC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מדחום</td><td>Omega Engineering, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אסוף פראקציות</td><td>גיבסון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פיפטור</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנציה הפוך</td><td>Olympus Corporation</td><td>IX71</td><td></td></tr><tr><td>התקן צימוד מטען (CCD)</td><td>QImaging</td><td></td><td>Retiga-SRV, Fast 1394</td></tr></tbody></table>

multi-פרמטרית perifusion איילט מערכת בתוך התקן perifusion microfluidic

A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device

המכשיר microfluidic perifusion איון פותחה להערכת הפרשת אינסולין הדינמי של איים רבים דימות פלואורסצנטי סימולטני של זרם סידן שינויים אפשריים המיטוכונדריה. המכשיר מורכב משלוש שכבות: השכבה הראשונה כוללת מערך של בארות microscale (500 מיקרומטר ו בקוטר 150 מיקרומטר עומק) המסייעים כדי לשתק את איים בעוד חשופים תזרים ולהגדיל את שטח הפנים חשוף של איים, את השכבה השנייה מכילה מעגלי perifusion קאמרית (3 מ&quot;מ עמוקה, בקוטר 7 מ&quot;מ); ואת השכבה השלישית מכילה ערוץ מפרצון-ערבוב כי האוהדים לפני הזרקה לתוך תא perifusion (2 מ&quot;מ רוחב, 19 מ&quot;מ אורך, 500 מיקרומטר גובה) לייעול את היעילות ערבוב לפני הכניסה לתא perifusion. יצירה של גלוקוז הדרגתיים שונים, כולל צורה ליניארית פעמון, צורות מרובע גם ניתן ליצור רשת perifusion microfluidic והוא הוכיח.

המכשיר microfluidic perifusion איון פותחה להערכת הפרשת אינסולין הדינמי של איים רבים דימות פלואורסצנטי סימולטני של זרם סידן שינויים אפשריים המיטוכונדריה.

Multi-פרמטרית Perifusion איילט מערכת בתוך התקן Perifusion Microfluidic

פותח מכשיר פריפוזיה (perifusion) מיקרופלואידי לאיילחים לצורך הערכה של הפרשת אינסולין דינמית ממספר איילחים ובמקביל פלואורסנציה...

במצגת זו, נציג מערכת פרפוזיה לערמומיות המבוססת על מיקרופלואידיקה למדידה סימולטנית של הפרשת אינסולין דינמית, זרימת סידן ושינויים בפוטנציאל המיטוכונדריאלי של אירי לבלב בתגובה למעוררי הפרשת אינסולין. מערכת הפרפוזיה מורכבת מהתקן מיקרופלואידי בעל שלוש שכבות, משאבות מזרק ואספן פראקציות. זרימת סידן ופוטנציאלים מיטוכונדריאליים המושרים על ידי מעוררי הפרשת אינסולין מדומיינים באמצעות מערך מיקרוסקופ פלואורסצנטי.שלום, שמי אולה, וולר מהמעבדה של ד"ר Val Holter במחלקה לכירורגיית השתלות באוניברסיטת אילינוי בשיקגו. שלום, אני דון לי, גם מהמעבדה של ד"ר Holter. שלום, אני טרישיה הארט, גם מהמעבדה של ד"ר Holter.היום נראה לכם פרוצדורה לדימוג בו-זמני של העפעפיים באמצעות מדרג גלוקוז ליניארי. השתמשנו בפרוצדורה זו במעבדה שלנו כדי לחקור את המראה והתפקוד של העפעפיים. אז בואו נתחיל.ההתקן המיקרופלואידי המשמש להליך זה מורכב משלוש שכבות של PDMS מאובהן שנוצרו באמצעות פוטוליתוגרפיה סטנדרטית. השכבה הראשונה, שנוצרה מתבנית סיליקון, מכילה את בארות ההתקן המיקרופלואידי שיחזיקו בעדינות את הלולאות במקומן, בעומק של 150 micrometers ובקוטר של 500 micrometers. השכבה השנייה כוללת תעלות בגובה 500 micrometers וברוחב שני מילימטרים.מרכז התעלה מורחב כדי לפרוס את הזרימה לצורך חילוף תמיסה טוב יותר. בתוך המכשיר, באר החילוף נוצרת על ידי ניקוב חור בגובה של 3 mm וברוחב של 7 mm במרכז השכבה. השכבה השלישית היא לוח עבה של PDMS. כדי להכין שכבה זו, נקבו חורים קטנים בשני הצדדים המיושרים עם הכניסה והיציאה של התעלה.בשכבה השנייה, לאחר שכל שלוש השכבות הוכנו, השכבה הראשונה מודבקת ללבידה של זכוכית כאשר הבארות פונות כלפי מעלה. לאחר מכן, השכבה השנייה מודבקת לשכבה הראשונה כאשר המרווחים של התעלות פונים כלפי מעלה. לבסוף, השכבה השלישית מודבקת לשכבה השנייה.לאחר שהשכבות הוחברו, המכשיר מוכן לשימוש בניסויים. השתמש במזרק של 10 milliliter מלא ב-70% ethanol ומחובר לפתח הכניסה של המכשיר באמצעות צינור Tygon, ועקר את המכשיר המיקרופלואידי על ידי הזרמת ה-ethanol דרך תעלות המכשיר. לאחר מכן, באמצעות אותה מערכת, הזרם מים דה-יוניזים (deionized water) כדי לשטוף את ה-ethanol.לאחר עיקור המכשיר, הניחו אותו על במה של מיקרוסקופ מחוממת באמצעות צינורות tigon, וחברו את משאבות המזרקים המכילות תמיסות גלוקוז בריכוז גבוה ונמוך למחבר Y. לאחר מכן, חברו אותן לכניסה של המכשיר המיקרופלואידי. חברו את היציאה של המכשיר המיקרופלואידי לאספן פראקציות.וודאו שהצינורית מונחת על פלטה מחממת בטמפרטורה של 37 °C. חשוב מאוד לשמור על התמיסות בטמפרטורה פיזיולוגית לאורך כל הניסוי. לאחר מכן, השתמשו בתוכנת LabVIEW כדי להתחיל את מפל הגלוקוז שיזרום דרך הרשת המיקרופלואידית במהלך הניסוי.תוכנה זו משנה את קצב הזרימה של שני תמיסות גלוקוז. על ידי בקרת משאבות המזרקים, ניתן ליצור כאן פרופילים שונים של מדרג גלוקוז: פרופילי מדרג גלוקוז ליניאריים, בצורת פעמון ובצורת ריבוע. בניסוי זה מוצגים ערכים צפויים מחושבים להשוואה; עבור המדרג הליניארי של 2 millimolar עד 25 millimolar גלוקוז, יעשה שימוש בקצב זרימה משתנה של 0.01 milliliters per minute של שתי תמיסות הגלוקוז ובקצב זרימה קבוע של 0.25 milliliters per minute הנכנס למכשיר לאחר ערבוב התמיסות.לאחר בחירת פרופיל הגרדיאנט המתאים, יש לבדוק את יציבות הגרדיאנט. ראשית, הפעל את מערכת הגרדיאנט. לאחר מכן, הפעל את אסוף הפראקציות ואסוף שמונה פראקציות בנפח של 1 mL למבחנות Eppendorf.לאחר מכן, בעזרת גלו可ומטר, בדוק את ריכוז הגלוקוז בכל מבחנה והזן את הנתונים ב-excel. נתח את התוצאות שהתקבלו מהגלו可ומטר. לאחר מכן, החלף את מזרק הגלוקוז בריכוז גבוה במזרק המכיל תמיסת 0.5%BSA בבופר Krebs ringer, ובצע פרפוזיה של 50 milliliters דרך המכשיר בקצב של one milliliter per minute.פעולה זו תמנע ספיגה לא ספציפית של אינסולין לדפנות המיקרו-ערוץ, כדי להבטיח דיוק בעת מדידה מאוחרת של רמות אינסולין מופרש לאחר פרפוזיה עם BSA. החליפו אותו בתמיסת גלוקוז בריכוז גבוה. השעו 25 עד 30 פסקאות עיניים של עכברים שנבחרו ידנית בבופר קרבס-רינגר עם 2 mM גלוקוז, המכיל את צבע מדד הסידן fira 2:00 AM ואת צבע מדד הפוטנציאל המיטוכונדריאלי rumine 1 2 3, דגרו למשך 30 דקות בטמפרטורה של 37 °C.לאחר הדגירה, נתק את המכשיר ממערכת הפרפוזיה והכנס בזהירות את האיליטים למכשיר המיקרופלואידי על ידי הכנסת קצה הפ pipette, המכילה את האיליטים, אל פתח הכניסה, ופיזור איטי של האיליטים. לאחר ההטענה, חבר מחדש את המכשיר למערכת הפרפוזיה, תוך הקפדה שלא להחדיר בועות אוויר. לאחר מכן, הפעל את משאבת המזרק כדי להתחיל בביצוע פרפוזיה לאיליטים באמצעות KRB המכיל 2 mM גלוקוז.שלב זה ישטוף את עודפי הצבע מהתווך, יגדיר את סטים של מסנני העירור והפליטה ואת זמני החשיפה שבהם ייעשה שימוש במהלך הניסוי. לאחר מכן, הגדירו את אספן הפרקציות לאסוף במרווחים של דקה אחת בזמן השטיפה של הלולאות עם תמיסת הגלוקוז בריכוז נמוך. השתמשו בכלי ה-region of interest או בכלי ה-ROI מתוך תוכנת הדימוי הפשוטה של ה-PCI כדי להגדיר את האזורים או הלולאות שברצונכם לדגום.בנוסף, סמנו במעגל את אזור הרקע שיוחסו לאחר שטיפת התאים למשך 10 דקות, הפעילו את אספן הפרקציות של מדרג הגלוקוז והתחילו בצילום time-lapse. לאחר 30 דקות, כבו את התוכנה ואת משאבת המזרק של גלוקוז בריכוז גבוה. המשיכו בביצוע פרפוזיה עם גלוקוז בריכוז נמוך כדי לשטוף את השפעת הגלוקוז בריכוז הגבוה.לאחר 10 דקות, הפסק את זרימת הגלוקוז בריכוז נמוך על ידי כיבוי משאבת המזרק. לאחר הפרפוזיה, ייצא את הנתונים לקובץ excel לצורך ניתוח. ניתן לקבוע את כמות האינסולין שהופרשה לתוך הפרפוסאט באמצעות ELA mouse eyelets.בוצעו פרפוזיה עם גרדיאנט ליניארי של 2 עד 25 מילימול גלוקוז כפי שמוצג כאן. זרימת סידום להפנים והפרשת אינסולין מופעלות לאחר כ-13 דקות של פרפוזיה, המתאימות לריכוז של 6 מילימול גלוקוז. שינויים בפוטנציאל המיטוכונדרי얼 נצפים מוקדם יותר, כצפוי, לאחר כ-11 דקות.נתונים אלו מדגימים את היתרון שבשימוש ברשת מיקרופלואידית זו לאפיון הפיזיולוגיה של ה-eyelet. הרגשנו להראות לכם כיצד להשתמש במכשיר ה-para fusion המיקרופלואידי שלנו למחקר של פיזיולוגיית eyelet. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור לוודא שאין בועות במכשיר, שכן אלה עלולות לגרום לתזוזת ה-eyelets במהלך הניסוי.בנוסף, ניתן לכוון את הזרימה עד ל-1 ml לדקה מבלי להפריע לטבעות הקיבוע. זהו, תודה שצפיתם ובהצלחה בניסוי שלכם.

a-multi-parametric-islet-perifusion-system-within-microfluidic

Research

JoVE Journal

Biology

אנו מדגימים פרוטוקולים לייצור מיכון אלסטומרי polydimethylsiloxane (PDMS) מבוססי מערכים microvalve כי אין צורך אנרגיה נוספת כדי לסגור תכונה כרכים מדויק מוגדר photolithographically. מיקסר במקביל subnanoliter נפח ומערכת משולבת זלוף microfluidic מוצגים.

שבבי microfluidic מבוקרת עם מערכים Microvalve אלסטומרי

אנו להדגים ייצור של המכשיר microfluidic פשוט כי ניתן לשלב עם setups תקן electrophysiology לחשוף משטחים microscale פרוסת המוח באופן מבוקר היטב נוירוטרנסמיטורים שונים.

פורסים גירוי המוח באמצעות רשת Microfluidic ולשכת זלוף רגילה

שיטת לתרבות monolayer תא האנדותל לאורך כל פני השטח הפנימי של המכשיר 3D microfluidic עם כלי הדם בגודל הערוצים (&lt;30 מיקרומטר) מתואר.

מיקרופלואידיקה Endothelialized לחקר אינטראקציות כלי הדם במחלות המטולוגיות

מקור: Vanegas, M. I., et al. מערכת מיקרו-הזרקה לעירוי תרופות משולב ואלקטרופיזיולוגיה. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים מכשיר מיקרופלואידית מבוסס מיקרואלקטרודה המספק תמיסת תרופות דרך צינור נימי, תוך שימוש בתמיסת סמן על בסיס שמן למעקב מדויק אחר נפח ומאפשר הקלטה עצבית ועירוי תרופות בו זמנית.

מערכת מיקרו-הזרקה מבוססת מיקרופלואידית לעירוי תרופות משולב ואלקטרופיזיולוגיה

בקרת חמצן מיקרופלואידית מעניקה יותר מסתם נוחות ומהירות על פני תאים היפוקסיים לניסויים ביולוגיים. במיוחד כאשר הוא מיושם באמצעות דיפוזיה דרך ממברנה, חמצן מיקרופלואידי יכול לספק אפנון פאזה נוזלית וגזית בו זמנית ברמת המיקרו-סקאלה. טכניקה זו מאפשרת ניסויים דינמיים רב-פרמטריים קריטיים לחקר פתופיזיולוגיה של איים.

בקרה כמותי וזמנית של Microenvironment חמצן ברמה יחיד Islet

תהליך הייצור של מכשיר מבוסס PDMS, רב שכבתי, microfluidic המאפשר שעתוק ותרגום מבחנה (IVTT) התגובות להתבצע על פני תקופות ממושכות מתוארת. יתרה מזאת, סקירה מקיפה של החומרה והתוכנה הדרושה להפיכת תגובות אלה לאוטומטיות ולשמירה על המשך ממושך מסופקת.

פלטפורמת מיקרופלואידיג רב שכבתית לצורך הובלה של ביטוי גנים ממושך ללא תא

מאמר זה מציג שיטה לבנייה והפעלה של מערכת תרבית תאים רב-ערוצית רב-ערוצית בעלות נמוכה למדידת הדינמיקה של הפרשה וקצבי ספיגה של מומסים בתהליכים תאיים. המערכת יכולה גם לחשוף תאים לפרופילי גירוי דינמיים.

ביוריאקטור פרפוזיה מרובה זרמים משולב עם פיצול מוצא לתרבית תאים דינמית

פרוטוקול זה מתאר שיטה לרכישה סינכרונית ורישום משותף של אירועי איתות תוך תאיים והפרשת אינסולין וגלוקגון על ידי פסאודואיסטים אנושיים ראשוניים באמצעות העברה אדנו-ויראלית של ביו-סנסור מחזורי אדנוזין מונופוספט (cAMP), גלאי הפרשי cAMP באתרו (cADDis) ומערכת מיקרופריפיוזיה.

מערכת פסאודואיסלט אנושית להערכה סינכרונית של דינמיקה ביו-חיישנית פלואורסצנטית ופרופילי הפרשת הורמונים

ניתוח בזמן אמת של רקמות חיות מניב נתונים פונקציונליים ומכניסטיים חשובים. מאמר זה מתאר את הפרוטוקולים והמשתנים הקריטיים כדי להבטיח ייצור מדויק וניתן לשחזור של נתונים על ידי מערכת זרימה רב-ערוצית חדשנית ונטולת משאבות, השומרת ומעריכה מגוון רחב של מודלים של רקמות ותאיים.

תחזוקה והערכה של סוגי רקמות ותאים שונים של העין באמצעות מערכת חדשנית של Pumpless Fluidics

פרוטוקול זה מתאר פלטפורמת תרבית תאים מבוססת קרום הניתנת להגדרה מחדש המשלבת את פורמט הבאר הפתוחה עם יכולות זרימת נוזלים. פלטפורמה זו תואמת לפרוטוקולים סטנדרטיים ומאפשרת מעברים הפיכים בין מצבי תרבית פתוחה ומיקרופלואידית, תוך מתן מענה לצרכים של מעבדות הנדסה וביו-מדע כאחד.

הפיכת מודלים של רקמת מחסום סטטי למערכות מיקרופיזיולוגיות דינמיות

הייצור של התקן דו-שכבתי מבוסס פולידימתילסילוקסאן (PDMS) לייצור ספריות קומבינטוריות בתחליבים של מים בשמן (תקעים) מוצג כאן. החומרה והתוכנה הדרושים לאוטומציה של ייצור תקעים מפורטים בפרוטוקול, ומודגם גם ייצור ספרייה כמותית של תקעים פלואורסצנטיים.

התקן מיקרופלואידי דו-שכבתי לייצור תקע קומבינטורי

למדו מערכת פריפוזיה מיקרופלואידית לבדיקת הפרשת אינסולין דינמית מאיי לנקראת עכברים. השיטה מאפשרת הדמיית סידן ופוטנציאל מיטוכונדרי בזמן אמת לחקר תפקוד לבלב ומחלות מטבוליות.

Multi-פרמטרית Perifusion איילט מערכת בתוך התקן Perifusion Microfluidic

גלה סרטונים נוספים