הערכת ההשפעות הנוירו-פרוטקטיביות של תרכובת בדיקה כנגד רעילות אלפא-סינוקלאין בתאי עצב עובריים של חולדות

התחל בתרבית ראשונית של המוח התיכון מעוברי חולדות, המכילה נוירונים דופמינרגיים המבטאים יתר על המידה אלפא-סינוקלאין מוטציה.

החלף את המדיה בבארות הטיפול במדיה טרייה המכילה את תרכובת הבדיקה, ואת זו בבארות הבקרה במדיה רגילה. ואז לדגור.

בביקורת, אלפא-סינוקלאין יוצר אגרגטים רעילים בתאי עצב דופמינרגיים, הגורמים לנסיגת נויריטים ומובילים למוות עצבי.

בטיפול, תרכובת הבדיקה מקיימת אינטראקציה עם אלפא-סינוקלאין, מונעת את הצטברותו, שומרת על מבנה הנויריט ומספקת הגנה עצבית.

תקן וחלחל את התאים, ואז חסום אתרי קשירה לא ספציפיים.

דגירה עם נוגדנים ראשוניים כדי לתייג את כל הנוירונים, עם תיוג נוסף לנוירונים דופמינרגיים.

שטפו את התאים והוסיפו נוגדנים משניים מתויגים פלואורופור ספציפיים לנוגדנים הראשוניים.

בעזרת מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך, ספרו את הנוירונים הדופמינרגיים המסומנים באופן דיפרנציאלי, ולאחר מכן עברו למיקרוסקופ קונפוקלי כדי למדוד את אורך הנויריטים.

ספירה גבוהה יותר של נוירונים דופמינרגיים עם נויריטים שלמים בטיפול בהשוואה לבקרות מאשרת את הפוטנציאל הנוירו-פרוטקטיבי של תרכובת הבדיקה.