אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
Microbiology
0 צפיות • 2:47 דק׳ • September 26th, 2025
קחו צלחת אגר נחיל התומכת בתנועתיות נחיל - תנועת חיידקים מתואמת על פני משטח מוצק למחצה היוצרת דפוסים דמויי קנוקנות.
חסנו את מרכז הצלחת בתרבית Pseudomonas aeruginosa והניחו תערובת של אותה תרבית עם אנטיביוטיקה במיקומי לוויין במרווחים שווים.
מכסים את הצלחת במכסה צבוע שחור כדי למזער את השתקפויות האור.
הנח את הצלחת על סורק שטוח בתוך אינקובטור הנשמר בלחות אופטימלית.
במהלך הדגירה, האוכלוסייה המרכזית מתחילה להתרבות ולנחיל.
כאשר הנחיל מתקרב למושבות שטופלו באנטיביוטיקה, הוא מזהה אותות לחץ המופרשים על ידי החיידקים ומפנה מחדש כדי להימנע מאזורים אלה.
הסורק, הנשלט על ידי תוכנה אוטומטית, מצלם תמונות ברזולוציה גבוהה במרווחי זמן קבועים.
אספו את התמונות הללו לסרטון כדי להמחיש את התקדמות הנחיל והימנעות ממנו לאורך זמן.
כמת הימנעות מנחיל על ידי מדידת המרחק מכל מושבת לוויין לקצה הנחיל המרכזי בתמונה בשלב מאוחר.
לאחר הנחת הלוחות בסורק, פתח file ושמור הגדרות כדי להגדיר את נתיב השמירה עבור התמונות ולחץ על סריקה ואישור במרווחים של 30 דקות. כדי להפוך את רכישת התמונות לאוטומטית, השתמש בתוכנת הסקריפטים.
בחר גם סריקה לא פעילה וגם סריקה בודדת ולחץ לחיצה ימנית על סריקה סרק, ולאחר מכן לחץ לחיצה ימנית על מופעל. בתום הדגירה, ייבא את כל התמונות הסרוקות ל-ImageJ. בחלון אפשרויות הרצף, מספר התמונות יציין את מספר התמונות שנבחרו.
המשך להתחיל את התמונה באחת כדי להתחיל מהתמונה הראשונה בתיקיה ואת קנה המידה של התמונות ב- 100% כדי לשמר את הגודל המקורי של התמונות. לחץ על המר ל- RGB כדי לשמור על התמונות בצבע. השאר את השתמש בערימה וירטואלית לא מסומן ולחץ על אישור כדי לטעון את התמונות.
נקישה קובץ, שמור בשם ו- AVI כדי למזג את התמונות לקובץ AVI. התאם את הדחיסה ל- JPEG ואת קצב הפריימים לחמש פריימים לשנייה. לאחר מכן שמור את ה-AVI time-lapse בתיקיית האחסון המתאימה.