אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
Microbiology
0 צפיות • 2:34 דק׳ • November 28th, 2025
התחילו עם מקטעי המטוקסילין והאאוזין של חולדות בלחץ חום, אחד מטופל מראש דרך הפה עם בופר כבקרה, והשני עם Bacillus subtilis suspension.
לחץ חום פוגע בחלבוני החיבור ההדוקים של המעי, מה שמוביל לקיצור הסדקים והריריות.
הטיפול המוקדם עם החיידק מקדם את שחרור מולקולות האיתות שמייצבות חלבוני חיבור צפופים, ושומרים על גובה הווילוס ועובי הריר.
התבוננו בחתכים תחת מיקרוסקופ אור ברזולוציה גבוהה כדי לזהות הבדלים בגובה הווילוס.
לאחר מכן, מניחים טיפה של דם טרי מכל חולדה על מחסניות זכוכית וכסו בכיסוי.
לחץ חום מערער את קרומינת הארתרוציטים האדומים ומשחרר מיקרווזיקולות לזרם הדם.
החיידקים מפחיתים לחץ חמצוני מערכתית, מייצבים את ממברנות הארתרוציטים ומפחיתים ווסיקולציה.
התבוננו בדגימות הדם תחת מיקרוסקופ אור ברזולוציה גבוהה כדי להעריך הבדלים בווסיקולציה.
גובה הווילוס המשומר במקטע המעי ופחות מיקרווזיקולות בדם מאשרים את ההשפעה המגנה של החיידקים תחת לחץ חום.
לאחר הכנה וצביעה של חלקי המעי הדק לפי פרוטוקול הטקסט, יש להשתמש במיקרוסקופ ברזולוציה גבוהה למדידת סדקי המעי ועובי הריר הכולל. נתח לפחות ארבע דגימות מכל עכברוש ובצע לפחות 20 מדידות בכל דגימה.
כדי לבצע מיקרוסקופיה אורית ברזולוציה גבוהה של דגימות דם, יש להשתמש בפלטפורמת בידוד הרטט כבסיס למערכת המיקרוסקופ עם מצלמת וידאו ומחשב להקלטת תמונות חיות. לאחר כיול תמונות הבדיקה לפי פרוטוקול הטקסט, הניחו שבעה מיקרוליטרים של דם טרי מכל חולדה על שקופית זכוכית והוסיפו כיסוי. לאחר מכן, יש לצלם ולהקליט עשרה פריימים של 72 על 53.3 מיקרומטרים בריבועים בכל דגימה.
לבסוף, באמצעות תוכנה המספקת תמונות אופטיות ברזולוציה גבוהה עם תצוגה ישירה בזמן אמת, למדוד את ריכוז השלחיפות.