השגת פרוסות מוח אופקיות של עכבר היפוקמפוס

קח את חצאי המוח של העכבר בתמיסה עתירת סוכרוז. אבטח את חצאי הכדור כשצד הגחון שלהם פונה כלפי מעלה על לוחית דגימת ויברטומה באמצעות דבק.

העבירו את לוחית הדגימה לתא החיתוך.

הוסף תמיסה עתירת סוכרוז קפואה למחצה כדי לשמור על התנאים הפיזיולוגיים של הרקמה ולמצק את הדבק.

ספק תערובת פחמן דו חמצני-חמצן לשמירה על חמצון הרקמות.

בעזרת פרמטרים מוגדרים, השג את הפרוסות הראשוניות והסר אותן. יתר על כן, השג פרוסות היפוקמפוס אופקיות.

העבירו בזהירות את פרוסות המוח הללו לתוך תא המכיל ACSF לשחזור רקמות.

פרוסות ההיפוקמפוס האופקיות מוכנות לניסויים נוספים.

הניחו את שתי ההמיספרות בצד הגבי הטרי שנחתך כשהחלק הגחוני של המוח פונה כלפי מעלה, והניחו טיפת דבק-על על צלחת דגימה. השתמש בקצה פיפטה כדי לפזר את הדבק לאזור גדול כדי להכיל את שתי פיסות הרקמה, וגע בפיסת רצועת נייר סינון בצד הגחון של חצי כדור אחד. השתמש ברצועת נייר סינון נוספת כדי לייבש בזהירות את הצד הגבי של המוח, ומקם את הצד הגבי של חצי הכדור כלפי מטה על הדבק על לוחית הדגימה.

השתמש בשתי רצועות נייר סינון נוספות כדי למקם את חצי הכדור השני על הדבק כפי שהודגם זה עתה, והנח את לוחית הדגימה בתא החיתוך. לאחר מכן, במהירות אך בזהירות, מכסים את הצלחת ברפש תמיסת פרוסות סוכרוז גבוהה כקרח. כדי לרכוש חלקים מרקמת המוח, מקם את להב הוויברטום מול הצד המדיאלי של ההמיספרות, והרם את שולחן הוויברטום כך שהלהב יהיה באותו גובה כמו הצדדים הגחוניים של ההמיספרות, הפונים כעת כלפי מעלה.

השתמש בבקרת הרטט כדי להוריד את הלהב 600 מיקרון עוד יותר בכיוון הגב, וחתוך את הרקמה עד ששתי הפרוסות הראשונות מופרדות לחלוטין משתי ההמיספרות. לאחר קבלת שתי פרוסות הרקמה הראשונות, הפוך את כיוון החיתוך, והורד את הלהב עוד 300 מיקרון לפני החיתוך שוב. כאשר ההיפוקמפוס נראה לעין, השתמשו בפיפטת פסטר מפלסטיק מורחבת כדי לאסוף ולהעביר את הפרוסות לתוך תא ההתאוששות באמבט המים.