אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
Neuroscience
0 צפיות • 2:42 דק׳ • July 8th, 2025
קח פיפטה הקלטה עם אלקטרודת תיל בתמיסת אלקטרוליט.
מקם את הפיפטה מעל פרוסת מוח משותקת.
כוונן את זרם הפיפטה כדי להפחית את אותות הרקע.
השתמשו במיקרוסקופ כדי לאתר את תא העצב ולהזיז את הפיפטה לכיוון הנוירון.
הפעל לחץ חיובי קל ונעל אותו.
הלחץ החיובי מפריע למשטח הרקמה, מה שמעיד על קרבה לתא.
קרבו את הפיפטה עד שנוצרת גומה על הממברנה, המסמלת מיקום נכון.
שחרר את הלחץ החיובי.
שימו לב לעלייה בהתנגדות כאשר התא יוצר חותם עם הפיפטה.
החזק את פוטנציאל הממברנה במתח שלילי קבוע ליציבות.
משוך את המיקרופיפטה כדי להסיר לחץ עודף.
התאם את התגובות החשמליות המהירות והאיטיות של הפיפטה לדיוק.
הפעל יניקה קצרה כדי לפרוץ את התא, וליצור חיבור חשמלי ישיר.
תצורת מהדק המתח של התא כולו מוכנה כעת לרישום אלקטרופיזיולוגיה.
כדי להשיג תצורת תא שלם, הנח את פיפטת ההקלטה ממש מעל הפרוסה, וקיזז את זרם הפיפטה במתח Clamp מצב. הפעל לחץ חיובי קל על הפיפטה ונעל את תא העצירה.
לאחר מכן, בחר תא בריא עם קרום שלם והתקרב לרקמה עם הפיפטה. הלחץ החיובי אמור לגרום להפרעה קלה ברקמה. קרבו לאט את הפיפטה לתא בתנועה אלכסונית עד שנוצרת גומה קטנה על פני התא. לאחר מכן, שחרר את נעילת הלחץ החיובי. התא יתחיל ליצור חותם וההתנגדות תגדל מעל ג'יגה אחד. במתח clamp, החזק את התא ב -68 מילי-וולט.
לאחר מכן, משוך מעט את הפיפטה מהתא באלכסון כדי להסיר לחץ עודף. לפצות על קיבול הפיפטה המהיר והאיטי. הפעל יניקה קצרה דרך הצינור המחובר למחזיק הפיפטה כדי לפרוץ את התא ולקבל תצורת תא שלם.