Leukemia

Questo video descrive la tecnica di colorazione delle cellule del midollo osseo utilizzando la colorazione May-Grünwald Giemsa. Nel protocollo, coloreremo le cellule di leucemia mieloide murina, cellule C149, per analizzare la morfologia e il conteggio differenziale.

Questo video descrive l'arricchimento delle cellule T dalla milza di un topo mediante selezione negativa utilizzando un separatore magnetico. La tecnica prevede di indirizzare le altre cellule del campione per la deplezione utilizzando anticorpi o ligandi diretti contro specifici antigeni della superficie cellulare.

Questo video descrive la tecnica di isolamento delle cellule c-kit positive dal midollo osseo di un topo. Nel protocollo, isoleremo cellule c-kit positive da un topo transgenico per convalidare c-Fos e Dusp1 da soli o insieme come bersagli farmacologici nella leucemia.

Questo video descrive il protocollo per la colorazione in immunofluorescenza BrdU. La tecnica consente l'identificazione di cellule in diverse fasi del ciclo cellulare. L'aggiunta di coloranti del DNA e la marcatura degli anticorpi consentono l'analisi dettagliata del destino delle cellule della fase S in tempi successivi.

Questo video descrive la tecnica di isolamento delle cellule di leucemia linfatica cronica (LLC) dal sangue periferico. Con questo protocollo, isoleremo le cellule CLL da campioni di sangue di pazienti umani per la successiva generazione efficiente di frazioni nucleari e citoplasmatiche.

Il video spiega un modo per purificare le cellule B mediante targeting immunomagnetico e separazione dalla sospensione di cellule mononucleate del sangue periferico. Il metodo prevede la marcatura di tipi di cellule indesiderate con anticorpi o ligandi specifici (legati a particelle magnetiche) che hanno come bersaglio specifiche proteine della superficie cellulare, da esaurire dalla sospensione cellulare eterogenea mediante separazione magnetica.

Questo video descrive un metodo per la separazione spaziale di tre sottopopolazioni di cellule leucemiche: le cellule leucemiche sospese che fluttuano liberamente nel terreno, le cellule leucemiche luminose di fase che hanno aderito alla superficie del monostrato di cellule stromali mesenchimali e le cellule leucemiche attenuate di fase che sono migrate sotto il monostrato di cellule stromali mesenchimali dalla co-coltura 2D.

Questo video descrive un protocollo dettagliato per isolare il midollo osseo intero fresco dagli arti posteriori del topo per studiare i difetti dell'intero midollo osseo per i pazienti con malattie del sangue come la leucemia.

Questo video descrive la separazione delle cellule di leucemia linfoblastica acuta dalle cellule stromali del midollo osseo utilizzando colonne G-10 di destrano reticolato di tipo gel dieci. Questo metodo aiuta a recuperare la popolazione di cellule tumorali che sono migrate al di sotto delle cellule stromali aderenti del midollo osseo, generando una popolazione di cellule tumorali "a fase attenuata".

Il video descrive un metodo di campionamento per la raccolta di sangue periferico dal seno retro-orbitale di un topo e l'ulteriore isolamento di cellule mononucleate dal sangue con centrifugazione a gradiente di densità.

Questo video descrive la tecnica di aspirazione del midollo osseo dalla colonna vertebrale iliaca e la preparazione dello striscio per la biopsia. Nell'esempio, eseguiamo l'aspirazione del midollo osseo da un paziente con leucemia mieloide acuta (LMA) ed esaminiamo le cellule per verificare la presenza di malattia residua misurabile (MRD), un importante biomarcatore prognostico.

Questo video descrive un protocollo per la generazione di cellule dendritiche - cellule chiave che presentano l'antigene che attivano le cellule T - dal midollo osseo di un topo adulto.

Questo video descrive il protocollo per isolare le HSPC dal midollo osseo e selezionarle utilizzando una tecnica di smistamento cellulare attivata fluorescente, che è un metodo per ottenere HSPC singolarmente selezionate. Coltiviamo queste cellule selezionate per ottenere cloni di HSPC.

Questo protocollo descrive la tecnica di isolamento delle cellule tumorali della leucemia linfoblastica acuta (T-ALL) marcate con fluorescenza da un pesce zebra adulto e di quantificazione utilizzando il colorante blu di tripano.

Il seguente protocollo descrive un metodo per isolare la popolazione laterale di cellule tumorali della leucemia linfoblastica acuta (T-ALL), costituita da cellule staminali, da un pesce zebra adulto. La popolazione laterale manca di marcatori cellulari prominenti e quindi utilizziamo il saggio di efflusso colorante Hoechst 33342 per isolarli.

Questo video descrive il protocollo per il taglio della cromatina utilizzando la digestione enzimatica della nucleasi micrococcica. Il taglio della cromatina è una fase essenziale dell'immunoprecipitazione della cromatina o del flusso di lavoro ChIp, che aiuta a studiare l'interazione proteina-DNA nelle cellule di leucemia mieloide cronica umana. Nel protocollo di funzionalità, il taglio della cromatina viene eseguito utilizzando la sonicazione.

Questo video descrive il danno selettivo delle cellule leucemiche umane utilizzando gli ultrasuoni a bassa frequenza. Questa applicazione degli ultrasuoni a bassa frequenza in una condizione preclinica in vitro dimostra che la distruzione cellulare può essere ottenuta per esaminare e confrontare gli effetti della sonicazione sulla leucemia e sulle cellule normali.

Questo articolo descrive il protocollo per il test XTT, che è un test colorimetrico per valutare la vitalità cellulare e l'attività mitocondriale.

Il video descrive il test di marcatura graduale degli impulsi di cellule di mammifero con bromodeossiuridina (BrdU) per misurare la proliferazione cellulare. L'assorbimento di BrdU consente il tracciamento temporale delle cellule che si trovavano nella fase di sintesi in un momento specifico, senza richiedere la sincronizzazione delle cellule.

Questo video descrive la tecnica per la co-coltura 2D a lungo termine di cellule leucemiche con cellule stromali del midollo osseo per studiare la loro interazione con il microambiente del midollo osseo. Il modello di cocoltura 2D utilizza le cellule di leucemia linfoblastica acuta e gli stromi o gli osteoblasti del midollo osseo che influenzano il fenotipo delle cellule tumorali. Questo studio supporterà l'indagine sui meccanismi che sono alla base della sopravvivenza delle cellule leucemiche...

Questo video descrive la preparazione di frazioni subcellulari da cellule leucemiche, che è un metodo per generare frazioni cellulari e nucleari da cellule leucemiche. Le frazioni nucleari e citoplasmatiche possono essere utilizzate per ulteriori analisi a valle.

Questo protocollo fornisce un approccio biochimico per misurare il tasso di acidificazione extracellulare (ECAR) e il tasso di consumo di ossigeno (OCR) delle cellule leucemiche primarie con saggio del flusso extracellulare. La valutazione del profilo metabolico di queste cellule aiuta a caratterizzare le loro richieste, portando a una terapia personalizzata.

Questo video descrive il protocollo per il test di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), che è una tecnica classica per dimostrare le interazioni proteina-DNA. Questa tecnica viene utilizzata per identificare i geni bersaglio nelle cellule di leucemia linfocitica cronica umana.

Questo video descrive il protocollo per la convalida genetica trasferendo geni bersaglio utilizzando retrovirus in linee cellulari di leucemia mieloide cronica. I retrovirus agiscono come mediatori per trasferire materiale genetico nella cellula leucemica attraverso il processo chiamato trasduzione, che consente l'espressione a lungo termine del gene bersaglio. Questo metodo può essere applicato a qualsiasi cellula bersaglio per la convalida genetica e lo sviluppo terapeutico.

Questo video descrive il protocollo per l'unità di formazione di colonie a base di metilcellulosa o saggio UFC, che aiuta a identificare e contare il numero di colonie formate da cellule leucemiche in risposta al trattamento con composti antitumorali.

Questo video spiega un metodo di cromatografia liquida quantitativa ad alte prestazioni in fase inversa (RP-HPLC) per misurare il metabolismo dell'adenosina e delle purine associate generato dal consumo di AMP nell'ambiente extracellulare delle cellule tumorali leucemiche. Il protocollo descrive un test RP-HPLC sensibile, specifico, affidabile e riproducibile, sviluppato e convalidato per la quantificazione di nucleotidi purinici extracellulari e nucleosidi prodotti da cellule di leucemia...