Rimozione di composti ramificati e ciclici mediante adduzione di urea per paleotermometria U^k'₃₇

1. Impostazione e preparazione dei materiali

1. Ottenere un estratto lipidico totale (TLE) utilizzando un metodo di estrazione con solvente (sonicazione, Soxhlet o estrazione con solvente accelerato (ASE)).
2. Acquista i seguenti materiali da qualsiasi rivenditore chimico: pipette e lampadine in vetro borosilicato bruciato; acqua pura; esano; Diclorometano (DCM); metanolo; urea.
   1. I reagenti devono essere puri e privi di idrocarburi. In alternativa, l'acqua pura può essere prodotta in laboratorio utilizzando un sistema di purificazione dell'acqua.
3. Ottenere flaconcini di vetro borosilicato da 4 mL con tappi rivestiti in PTFE.

2. Metodi

1. Fare una miscela di 2:1 DCM:Esano (v:v).
   1. In un matraccio Erlenmeyer, mescolare 200 mL di DCM e 100 mL di esano.
2. Fare una miscela di urea in metanolo (100 mg / ml).
   1. Versare 300 ml di metanolo in un matraccio Erlenmeyer.
   2. Aggiungere 300 mg di urea.
   3. Mescolare su una piastra di agitazione automatica fino a quando l'urea è completamente sciolta.
3. Iniziare con il campione secco in un flaconcino da 4 ml.
4. Sospendere il campione in 1,5 mL di una miscela 2:1 di DCM:esano (v:v).
   1. Se il campione non si dissolve completamente, sonicare per 5 minuti.
5. A questa miscela, aggiungere 1,5 ml di urea in metanolo.
   1. Dopo questa aggiunta, guarda per un precipitato bianco per formare. Questo segnala la creazione di cristalli di urea.
6. Asciugare delicatamente i cristalli sotto azoto, usando calore delicato. Assicurarsi che tutto il solvente sia evaporato prima di procedere al passaggio successivo.
7. Risciacquare i cristalli 3x con circa 1 mL di esano. Rimuovere l'esano tra ogni risciacquo usando una pipetta di vetro per trasferirlo in una fiala etichettata "non addotto".
8. Sciogliere i cristalli in 2 ml di acqua pura. Agitare per garantire la completa dissoluzione.
9. Estrarre la fase acquosa con esano aggiungendo 1 mL e agitando delicatamente per 5 s.
10. Lasciare che l'esano e l'acqua si separtino completamente prima di rimuovere circa il 75% dell'esano usando una pipetta di vetro e trasferirlo in una fiala etichettata "addotto".
11. Ripetere due volte il passaggio 2.10.
12. Smaltire l'acqua e la soluzione di urea in un contenitore per rifiuti appropriato.