JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscience
0 visualizzazioni • 2:59 min. • August 29th, 2025
Fissare un topo anestetizzato post-ictus su un telaio stereotassico.
Riaprire l'incisione del cuoio capelluto e pulire il cranio esposto con cotone imbevuto di soluzione salina.
Identificare il nucleo necrotico bianco-giallo nel tessuto cerebrale e un foro di bava che conferma il sito dell'ictus.
Questo nucleo necrotico contiene neuroni danneggiati e vascolarizzazione non funzionale.
Collegare una siringa microporosa caricata con particelle di idrogel alla pompa e impostare le coordinate di iniezione.
Abbassare la siringa sopra il foro della fresa, quindi inserirla nel sito dell'ictus.
Iniettare l'idrogel a una velocità di flusso controllata per garantire una diffusione graduale senza danni al tessuto cerebrale.
Incubare per consentire all'idrogel di reticolare, formando un'impalcatura di biomateriale.
Ritrarre lentamente la siringa, assicurando la ritenzione dell'idrogel senza perdite.
Chiudi l'incisione con la colla chirurgica e rimetti il topo nella sua gabbia.
L'impalcatura in idrogel imita la matrice extracellulare, inducendo l'infiltrazione cellulare e la formazione di nuovi vasi sanguigni, indicando il potenziale dell'idrogel in neuroterapia.
Riapri l'incisione sul cervello e usa del cotone imbevuto di soluzione salina per pulire eventuali detriti dal cranio.
Saranno visibili un cerchio di tessuto bianco e giallo e il foro della bava del trapano. Bloccare la pompa di iniezione a 90 gradi sopra il mouse.
Caricare la siringa sulla pompa e spostare la pompa e le direzioni X e Y per orientare la siringa sul foro della fresa. Spostare la pompa in direzione Z finché l'ago non tocca la parte superiore del foro.
E reimpostare la Z sulla console del display digitale. Spostare la siringa di 0,75 millimetri nella direzione Z e premere start sulla console della pompa per iniettare da quattro a sei microlitri di idrogel a una portata di un microlitro al minuto. Quando tutto l'idrogel è stato erogato, impostare un timer di cinque minuti per consentire al gel di iniziare la reticolazione.
Dopo cinque minuti, ruotare la manopola Z per sollevare lentamente la siringa. Quando l'ago è abbastanza lontano dal cranio, sbloccare e rimuovere la pompa. Quindi chiudi la pelle sopra il cranio e metti il topo in una gabbia pulita con monitoraggio fino a quando non si sarà ripreso dall'anestesia.