JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiology
0 visualizzazioni • 2:14 min. • October 30th, 2025
Inizia con un estratto di lievito Todd-Hewitt sterile, o piastra di agar THY, un terreno ricco di sostanze nutritive che supporta la crescita di Streptococcus mitis, un batterio patogeno.
Utilizzando un anello sterile, striare la piastra con il ceppo batterico.
Metti la piastra inoculata in un barattolo di candele, accendi una candela, sigilla ermeticamente il barattolo e incuba.
La candela accesa consuma ossigeno e aumenta i livelli di anidride carbonica, creando un ambiente microaerofilo che imita le condizioni simili all'ospite.
I nutrienti nel terreno e nell'ambiente microaerofilo del barattolo migliorano la proliferazione batterica e promuovono lo sviluppo di un fenotipo di virulenza.
Dopo l'incubazione, rimuovere il coperchio del barattolo e recuperare la piastra.
Utilizzando un ansa sterile, prelevare una singola colonia isolata e trasferirla in una provetta conica sterile contenente il brodo THY.
Incubare la coltura in condizioni statiche per supportare la crescita batterica preservando il fenotipo di virulenza.
Questa coltura può essere utilizzata come modello patogeno per studiare le interazioni ospite-patogeno.
Prima della preparazione degli streptococchi Mitis Group, riscaldare le piastre di agar THY in un'incubatrice a 37 gradi Celsius.
Successivamente, utilizzare un anello sterile per strisciare i ceppi desiderati di Streptococci sulle piastre.
Quindi, metti le piastre in un barattolo di candele e incuba il barattolo a 37 gradi Celsius durante la notte per circa 18 ore per fornire un ambiente microaerofilo.
Il giorno successivo, rimuovi i piatti dal barattolo di candele e usa un anello sterile per raccogliere le colonie isolate.
Inoculare provette coniche sterili da 15 millilitri contenenti 2 millilitri di brodo THY.
Chiudere bene i tappi e incubare le provette a 37 gradi Celsius in condizioni statiche.