JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiology
0 visualizzazioni • 2:22 min. • October 30th, 2025
Inizia con un topo anestetizzato in posizione supina, con il collo rasato.
Disinfettare l'area rasata.
Fai un'incisione nel collo, quindi seziona il muscolo per esporre la trachea, le vie aeree che portano al tratto respiratorio inferiore, compresi i polmoni.
Prendi una siringa precaricata con batteri patogeni per i polmoni, posizionata tra due piccoli volumi d'aria.
Inserire l'ago nella trachea e iniettare il primo volume d'aria per liberare la trachea.
Successivamente, somministrare l'inoculo batterico, seguito dal secondo volume d'aria per migliorare la dispersione batterica più in profondità nel tratto respiratorio inferiore.
Tenere brevemente il mouse in verticale per favorire una distribuzione uniforme dei batteri in tutto il tratto respiratorio inferiore.
Sigillare l'incisione con adesivo in tessuto e lasciare che il topo si riprenda.
Questo metodo consente la somministrazione diretta di agenti patogeni nel tratto respiratorio inferiore, bypassando le barriere delle vie aeree superiori.
Inizia con l'anestetizzazione del topo e verifica che sia adeguatamente anestetizzato usando un pizzico per le dita dei piedi.
Quindi, posiziona il topo supino e rade la zona ventrale del collo. Disinfettare la pelle esposta. Ora, solleva la pelle della parte ventrale superiore del collo con una pinza per denti di ratto e, usando un bisturi, fai un'incisione da mezzo a un centimetro sopra il timo.
Quindi, separare con cura il muscolo per esporre la trachea. Nella trachea, iniettare lentamente 50 microlitri di aria, seguiti da 50 microlitri di NTHi preparato, seguiti da altri 50 microlitri di aria.
Dopo l'iniezione, mantenere l'animale in posizione verticale per circa un minuto. Quindi, chiudere l'incisione con un adesivo in tessuto e tenere il mouse sdraiato lateralmente e caldo per circa 10 minuti.