Sonda laser Doppler di posizionamento: una tecnica per impiantare una sonda sull'arteria cerebrale media per la misurazione del flusso sanguigno in un modello murino

0 visualizzazioni2:22 min. • July 8th, 2025

L'arteria cerebrale media, o MCA, è un vaso cerebrale prominente che fornisce sangue ossigenato al cervello.

Per misurare il flusso sanguigno all'interno dell'MCA, posizionare un topo anestetizzato in posizione prona. Fai una piccola incisione sul cuoio capelluto tra l'orecchio sinistro e l'occhio sinistro per individuare l'osso temporale del cranio. Taglia gli strati muscolari adiacenti e ritraili per visualizzare l'MCA sotto l'osso del cranio.

Posizionare il supporto della sonda contenente la sonda laser Doppler sopra l'MCA. Questo passaggio consente di impiantare la sonda vicino all'arteria. Applicare la colla chirurgica per trattenere la sonda nella sua posizione. Usando altra colla, chiudere la pelle attorno alla sonda impiantata e coprire il sito della ferita.

Collegare la sonda a un dispositivo laser Doppler. La sonda focalizza un raggio laser a una particolare frequenza su una regione ristretta dell'MCA. Successivamente, i globuli rossi che scorrono nell'arteria assorbono il raggio laser.

Essendo in movimento, queste cellule disperdono il laser, causando uno spostamento Doppler, un apparente cambiamento nella frequenza delle onde emesse. Il rilevatore cattura questi minuscoli spostamenti di frequenza per misurare il flusso sanguigno all'interno dell'arteria.

Preparare un supporto per la sonda laser Doppler tagliando la punta di una punta per pipetta da 10 microlitri. Una volta che il mouse è completamente anestetizzato, posizionarlo in posizione prona nell'area operativa. Inserire delicatamente la sonda rettale per monitorare la temperatura durante le procedure chirurgiche. Dopo aver disinfettato il sito chirurgico, tagliare il cuoio capelluto tra l'orecchio sinistro e l'occhio per esporre l'osso del cranio.

Successivamente, taglia e ritira il muscolo temporale per visualizzare le arterie cerebrali multiple o MCA sotto il cranio. Fissare la parte esterna della punta, tenendo la sonda laser Doppler o la fibra sopra l'MCA sinistro con la colla, e chiudere la pelle in modo che anche la pelle sia incollata. Applicare due o tre gocce di colla indurente per accelerare il processo. Assicurarsi che la fibra laser Doppler non sia incollata e possa essere facilmente rimossa dal supporto della punta in qualsiasi momento.