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Immunology
0 visualizzazioni • 2:16 min. • July 8th, 2025
Un linfonodo è un organo linfoide secondario di forma ovoidale presente in tutto il corpo che funziona nel collegare le risposte immunitarie innate e adattative consentendo le interazioni tra le cellule immunitarie.
Per isolare un linfonodo politeo drenante murino – un nodo che riceve linfa dalle zampe posteriori – iniziare prendendo un topo soppresso fissato su un palco in posizione prona.
Preparare il topo applicando olio minerale sulla regione del polpaccio delle zampe posteriori. L'olio impedisce la deposizione di pelo attorno al sito dell'incisione chirurgica durante la rimozione della pelle.
Praticare un'incisione sulla linea mediana dal tallone al ginocchio nella regione del polpaccio. Dissociare la pelle dalla muscolatura sottostante ed esporre la fossa poplitea, una depressione poco profonda dietro l'articolazione del ginocchio.
Il linfonodo drenante popliteo appare come una sfera traslucida all'interno della fossa, incorporata nel tessuto adiposo della fossa. Rimuovere il linfonodo e metterlo in un piatto di coltura.
Quindi, rimuovere con cura il tessuto adiposo che circonda il nodo per facilitare l'imaging al microscopio. Coprire l'organo con un foglio assorbente imbevuto di un apposito tampone. Il tampone aiuta a mantenere il livello di idratazione per preservare la vitalità dei tessuti.
Il linfonodo popliteo drenante è pronto per i saggi di imaging ex vivo a valle.
Per il prelievo dei linfonodi drenanti poplitei, applicare olio minerale sul polpaccio e sul ginocchio sul lato iniettato dell'animale. Quindi, praticare un'incisione sulla linea mediana nel polpaccio dal tallone al ginocchio e dissociare la muscolatura del polpaccio dalla pelle.
Esporre la fossa poplitea. Il linfonodo popliteo apparirà come una sfera traslucida all'interno della fossa. Quindi, rimuovere il linfonodo con la pinza curva per microchirurgia.