JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscience
0 visualizzazioni • 2:11 min. • July 8th, 2025
Prendiamo un topo geneticamente modificato con una fibra ottica impiantata chirurgicamente e un gruppo di array di elettrodi di registrazione nell'ippocampo.
Il setto mediale del topo contiene neuroni GABAergici sensibili ai canali ionici che esprimono la luce, che proiettano agli interneuroni nell'ippocampo.
Collegare un preamplificatore al connettore array impiantato per migliorare i segnali elettrici registrati.
Collegare il cavo patch alla fibra ottica impiantata per l'erogazione della luce.
Registra l'attività neurale di base senza stimolazione luminosa.
Erogare impulsi luminosi della frequenza desiderata all'ippocampo, che attiva i canali ionici sensibili alla luce dei neuroni GABAergici, causando un afflusso di ioni positivi e innescando potenziali d'azione.
Questa eccitazione neuronale provoca il rilascio di neurotrasmettitori inibitori sugli interneuroni ippocampali, inibendoli.
L'inibizione ritmica degli interneuroni da parte della stimolazione luminosa bilancia gli input eccitatori e inibitori, sincronizzando l'attivazione dei neuroni piramidali e producendo attività neurale ritmica nell'ippocampo, nota come oscillazioni theta.
Controllare l'emissione luminosa dal cavo patch. Se la velocità di trasmissione della fibra impiantata era del 50%, assicurarsi che l'emissione luminosa sulla punta del cavo patch sia di 20 mW. Collegare il preamplificatore dello stadio principale al connettore impiantato e collegare il cavo patch in fibra ottica alla fibra ippocampale impiantata per la stimolazione optogenetica.
Registrare il comportamento di base per una durata appropriata per i parametri da misurare. Aprire il software per controllare il generatore di stimoli. Fare clic su File, Apri e selezionare il file di protocollo desiderato. Fare clic su Scarica e avvia per avviare la stimolazione luminosa. Osservate il controllo del ritmo theta da parte degli impulsi luminosi.