Name: Produzione basata su microbioreattori di cellule stromali mesenchimali dipendenti dallancoraggio, preparate per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-12T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: Scopri la produzione scalabile di cellule stromali mesenchimali in microbioreattori per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta. Questo metodo migliora il controllo ambientale e la resa cellulare.

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<ol><li>Sin, W. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-density+microfluidic+bioreactor+for+the+automated+manufacturing+of+CAR+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">A high-density microfluidic bioreactor for the automated manufacturing of CAR T cells.</a> Nat Biomed Eng. 8 (12), 1571-1591 (2024).</li>
<li>US Food and Drug Administration. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22FDA+Approves+First+Mesenchymal+Stromal+Cell+Therapy+to+Treat+Steroid-refractory+Acute+Graft-versus-host+Disease%22">FDA Approves First Mesenchymal Stromal Cell Therapy to Treat Steroid-refractory Acute Graft-versus-host Disease</a>. , (2024).</li>
<li>Thompson, B. T., Chambers, R. C., Liu, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Respiratory+Distress+Syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> N Engl J Med. 377 (6), 562-572 (2017).</li>
<li>Torres Acosta, M. A., Singer, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+COVID-19-induced+ARDS%3A+implications+for+an+ageing+population%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of COVID-19-induced ARDS: implications for an ageing population.</a> Eur Respir J. 56 (3), 200249(2020).</li>
<li>Matthay, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory distress syndrome.</a> Nat Rev Dis Primers. 5 (1), 18(2019).</li>
<li>Kidd, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+evidence+of+mesenchymal+stem+cell+tropism+for+tumor+and+wounding+microenvironments+using+in+vivo+bioluminescent+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Direct evidence of mesenchymal stem cell tropism for tumor and wounding microenvironments using in vivo bioluminescent imaging.</a> Stem Cells. 27 (10), 2614-2623 (2009).</li>
<li>Gnecchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+supporting+paracrine+hypothesis+for+Akt-modified+mesenchymal+stem+cell-mediated+cardiac+protection+and+functional+improvement%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Evidence supporting paracrine hypothesis for Akt-modified mesenchymal stem cell-mediated cardiac protection and functional improvement.</a> FASEB J. 20 (6), 661-669 (2006).</li>
<li>Doron, G., Temenoff, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+Substrates+for+Improved+Manufacture+of+Mesenchymal+Stromal+Cell+Therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">Culture Substrates for Improved Manufacture of Mesenchymal Stromal Cell Therapies.</a> Adv Healthc Mater. 10 (15), e2100016(2021).</li>
<li>Noronha, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Priming+approaches+to+improve+the+efficacy+of+mesenchymal+stromal+cell-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Priming approaches to improve the efficacy of mesenchymal stromal cell-based therapies.</a> Stem Cell Res Ther. 10 (1), 131(2019).</li>
<li>Hezam, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superior+protective+effects+of+PGE2+priming+mesenchymal+stem+cells+against+LPS-induced+acute+lung+injury+%28ALI%29+through+macrophage+immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Superior protective effects of PGE2 priming mesenchymal stem cells against LPS-induced acute lung injury (ALI) through macrophage immunomodulation.</a> Stem Cell Res Ther. 14 (1), 48(2023).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stromal+cells+alleviate+acute+respiratory+distress+syndrome+through+the+cholinergic+anti-inflammatory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stromal cells alleviate acute respiratory distress syndrome through the cholinergic anti-inflammatory pathway.</a> Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 307(2022).</li>
<li>Full Prescribing Information - Ryoncil. , 
 <a target="_blank" href="https://www.ryoncil.com/pdfs/prescribing-information.pdf">https://www.ryoncil.com/pdfs/prescribing-information.pdf</a> (2024).</li>
<li>Kumar, A., Starly, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+scale+industrialized+cell+expansion%3A+producing+the+critical+raw+material+for+biofabrication+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Large scale industrialized cell expansion: producing the critical raw material for biofabrication processes.</a> Biofabrication. 7 (4), 044103(2015).</li>
<li>Rennerfeldt, D. A., Raminhos, J. S., Leff, S. M., Manning, P., Van Vliet, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergent+heterogeneity+in+putative+mesenchymal+stem+cell+colonies%3A+Single-cell+time+lapsed+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Emergent heterogeneity in putative mesenchymal stem cell colonies: Single-cell time lapsed analysis.</a> PLoS One. 14 (4), e0213452(2019).</li>
<li>Mets, T., Verdonk, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Vitro+Aging+of+Human+Bone+Marrow+Derived+Stromal+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Ageing+Dev%22%5BJournal%5D)">In Vitro Aging of Human Bone Marrow Derived Stromal Cells.</a> Mech Ageing Dev. 16, 81-89 (1981).</li>
<li>Colter, D. C., Sekiya, I., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+subpopulation+of+rapidly+self-renewing+and+multipotential+adult+stem+cells+in+colonies+of+human+marrow+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Identification of a subpopulation of rapidly self-renewing and multipotential adult stem cells in colonies of human marrow stromal cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98 (14), 7841-7845 (2001).</li>
<li>Tremain, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroSAGE+Analysis+of+2%2C353+Expressed+Genes+in+a+Single+Cell-Derived+Colony+of+Undifferentiated+Human+Mesenchymal+Stem+Cells+Reveals+mRNAs+of+Multiple+Lineages%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">MicroSAGE Analysis of 2,353 Expressed Genes in a Single Cell-Derived Colony of Undifferentiated Human Mesenchymal Stem Cells Reveals mRNAs of Multiple Lineages.</a> Stem Cells. 19 (5), 408-418 (2001).</li>
<li>Klein, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prevalent+neglect+of+environmental+control+in+mammalian+cell+culture+calls+for+best+practices%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">A prevalent neglect of environmental control in mammalian cell culture calls for best practices.</a> Nat Biomed Eng. 5 (8), 787-792 (2021).</li>
<li>Bellani, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scale-Up+Technologies+for+the+Manufacture+of+Adherent+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Scale-Up Technologies for the Manufacture of Adherent Cells.</a> Front Nutr. 7, 575146(2020).</li>
<li>Krupczak, B., Farruggio, C., Van Vliet, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manufacturing+mesenchymal+stromal+cells+in+a+microcarrier-microbioreactor+platform+can+enhance+cell+yield+and+quality+attributes%3A+case+study+for+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Manufacturing mesenchymal stromal cells in a microcarrier-microbioreactor platform can enhance cell yield and quality attributes: case study for acute respiratory distress syndrome.</a> J Transl Med. 22 (1), 614(2024).</li>
<li>Ng, E. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissolvable+Gelatin-Based+Microcarriers+Generated+through+Droplet+Microfluidics+for+Expansion+and+Culture+of+Mesenchymal+Stromal+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Dissolvable Gelatin-Based Microcarriers Generated through Droplet Microfluidics for Expansion and Culture of Mesenchymal Stromal Cells.</a> Biotechnol J. 16 (3), e2000048(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Soluzione antiaderente per risciacquo</td><td>Tecnologie Stemcell</td><td>7010</td><td></td></tr><tr><td>Cabina di biosicurezza</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microbioreattore Breez</td><td>MilliporeSigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubo conico, 15 mL</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubo conico, 50 mL</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium, basso livello di glucosio</td><td>Gibco</td><td>11885084</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Siero bovino fetale</td><td>Gibco</td><td>A5670701</td><td></td></tr><tr><td>Emocitometro</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nastro da laboratorio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microcarrier</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubo microcentrifuga, 1,5 mL</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscopio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ago, smussato, 4", calibro 18</td><td>Amazon</td><td>B0D663ZR6D</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Corning</td><td>21-040-CM</td><td></td></tr><tr><td>Pronase, da Streptomyces griseus</td><td>MilliporeSigma</td><td>10165921001</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta sierologica, 10 mL</td><td>VWR</td><td>75816-100</td><td></td></tr><tr><td>Acqua sterile deionizzata</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filtro a siringa, 0,22 um, sterile</td><td>Prodotti scientifici Celltreat</td><td>229762</td><td></td></tr><tr><td>Siringa, 1 mL</td><td>BD</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Siringa, 20 mL</td><td>BD</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>Siringa, 5 mL</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Siringa, 50 mL</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Fiaschetta di polistirene per coltura tissutale, T75</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>130190</td><td></td></tr><tr><td>Trippan Blue</td><td>SigmaAldrich</td><td>T8154-100ML</td><td></td></tr></tbody></table>

produzione basata su microbioreattori di cellule stromali mesenchimali dipendenti dall'ancoraggio, preparate per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta

Microbioreactor-Based Production of Anchorage-Dependent Mesenchymal Stromal Cells Primed for Acute Respiratory Distress Syndrome

Produzione basata su microbioreattori di cellule stromali mesenchimali dipendenti dall'ancoraggio, preparate per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta

Cell-based therapy is an emerging therapeutic approach for a range of health conditions. However, producing sufficient quantities of quality cells remains ...

microbioreactor-based-production-anchorage-dependent-mesenchymal

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Abbiamo sviluppato una coltura cellulare automatizzata e piattaforma di interrogatorio per esperimenti di stimolazione cellulare micro-scala. La piattaforma offre un controllo semplice, versatile e preciso nel coltivare e stimolare le piccole popolazioni di cellule, e recuperando lisati per le analisi molecolari. La piattaforma è adatto a studi che impiegano cellule preziosi e / o reagenti.

Una piattaforma automatizzata versatile per micro-scala Cellulari esperimenti di stimolazione

La decellularizzazione dell'intero organo produce scaffold biologici naturali che possono essere utilizzati per la medicina rigenerativa. Viene presentata la descrizione di un modello di rigenerazione polmonare di primati non umani in cui interi polmoni vengono decellularizzati e quindi seminati con cellule staminali adulte e cellule endoteliali in un bioreattore che facilita la circolazione vascolare e la ventilazione con mezzi liquidi.

Decellularizzazione e ricellularizzazione polmonare di primati non umani utilizzando un bioreattore specializzato per grandi organi

Utilizzando un bioreattore pneumatico, dimostriamo l'assemblaggio, il funzionamento e le prestazioni di questo sistema di bioreattore monouso per la crescita di cellule di mammifero.

La coltivazione di cellule di mammifero utilizzando un singolo-uso del sistema pneumatico Bioreattore

Il potenziale terapeutico delle cellule staminali/stromali mesenchimali (MSC) è ben documentato, tuttavia il metodo migliore per preparare le cellule per i pazienti rimane controverso. In questo articolo, comunichiamo i protocolli per generare e somministrare in modo efficiente aggregati sferici terapeutici o "sferoidi" di MSC innescati in condizioni prive di xeno per applicazioni sperimentali e cliniche.

Produzione e somministrazione di Therapeutic staminali mesenchimali / stromali cellulare (MSC) Spheroids innescato in Culture 3-D, in condizioni Xeno-free

Condrogenesi da cellule staminali richiede la messa a punto delle condizioni di coltura. Qui vi presentiamo un approccio magnetico per condensare le cellule, un passo essenziale per iniziare condrogenesi. Inoltre, mostriamo che la maturazione dinamico in un bioreattore applica stimolazione meccanica ai costrutti cellulari e aumenta la produzione di matrice extracellulare cartilaginea.

3D Stem magnetica cellulare Aggregazione e bioreattore maturazione per la cartilagine Regeneration

Vi proponiamo un protocollo di espansione delle cellule su microcarriers macroporosa e loro uso come sistema di consegna in un bioreattore di perfusione per inizializzare una matrice di tessuto decellularizzati. Abbiamo anche diverse tecniche per determinare la proliferazione delle cellule e l'attuabilità delle cellule coltivate su microcarriers. Inoltre, dimostriamo la funzionalità delle cellule dopo le culture di bioreattore.

Ricombinante collagene Peptide Microcarriers per l'espansione delle cellule e loro potenziale utilizzo come sistema di consegna di cella in un bioreattore modello

Il protocollo descrive un bioreattore abilitato all'imaging che consente la rimozione selettiva dell'epitelio endogeno dalla trachea di ratto e la distribuzione omogenea di cellule esogene sulla superficie del lume, seguita da una coltura in vitro a lungo termine del costrutto cellula-tessuto.

Bioreattore guidato da imaging per la generazione di tessuto delle vie aeree bioingegnerizzato

Presentato qui è un metodo riproducibile, economico e robusto per l'isolamento e l'espansione delle cellule epiteliali bronchiali primarie per il biobanking a lungo termine e la generazione di cellule epiteliali differenziate mediante coltura all'interfaccia aria-liquido.

Isolare le cellule epiteliali bronchiali dal tessuto polmonare resecato per il biobanking e stabilire colture di interfaccia aria-liquido ben differenziate

Qui, presentiamo un protocollo per ottenere la produzione su larga scala di cellule aderenti attraverso un sistema completamente chiuso basato su microcarrier solubili di grado GMP. La coltivazione di cellule staminali mesenchimali umane, cellule HEK293T e cellule Vero è stata convalidata e ha soddisfatto sia le richieste di quantità che i criteri di qualità per l'industria della terapia cellulare e genica.

Produzione di celle su larga scala basata su microcarrier porosi solubili di grado GMP

Il Minibioreactor Array (MBRA) è un sistema di coltura ad alto rendimento, personalizzabile e a flusso continuo che consente la coltivazione di comunità microbiche complesse, supportando esperimenti paralleli per studiare le dinamiche del microbioma, le interazioni terapeutiche e le risposte microbiche ai fattori ambientali.

Protocollo aggiornato per l'assemblaggio e l'uso dell'array di minibioreattori (MBRA)

Scopri la produzione scalabile di cellule stromali mesenchimali in microbioreattori per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta. Questo metodo migliora il controllo ambientale e la resa cellulare.

Produzione basata su microbioreattori di cellule stromali mesenchimali dipendenti dallancoraggio, preparate per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta (Video) | JoVE Journal

Produzione basata su microbioreattori di cellule stromali mesenchimali dipendenti dall'ancoraggio, preparate per la sindrome da difficoltà respiratoria acuta

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