蛍光トレーサーを用いたマウスの虚血時の脳血流の可視化

麻酔をかけたマウスを仰臥位に固定します。

首を切開して、両側の総頸動脈を露出させ、ゆるく結紮します。

切開部をゆるく閉じ、マウスを腹臥位に置きます。

頭皮を剃り、消毒し、切開して頭蓋骨を露出させます。

軟部組織を取り外し、関心のある領域の頭蓋骨に金属フレームを接着します。

マウスを鋼板に固定します。

表面の脳血管が見えるまで頭蓋骨を薄くするためにドリルで穴を開けます。

フルオロフォアタグ付きデキストランを尾静脈に注入します。

デキストランは血流を循環して脳に到達し、脳血管にラベルを付けます。

蛍光顕微鏡を使用して、薄くなった頭蓋骨を通る脳の血流を視覚化します。

マウスを仰臥位に置き、頸動脈縫合糸を締めて脳の血流を制限し、虚血をシミュレートします。

薄くなった頭蓋骨を顕微鏡で再可視化し、血流が減少した虚血領域を特定し、血漿漏れを検出します。