酸化還元色素添加半固体培地を使用した細菌運動性の可視化

サンプル細菌株を含む培養プレートから始めます。

滅菌された接種針を使用して、単離されたコロニーを選択します。

無菌条件下で、このコロニーを無色の酸化還元染料を添加した半固体培地に穿刺接種します。半固体培地は、細菌の受動的拡散を制限します。

コントロールチューブ、べん毛を欠く非運動性細菌株の陰性対照、および運動性の高い鞭毛のある細菌株の陽性対照を準備します。

細菌の増殖と運動性をサポートするために、接種されたすべてのチューブをインキュベートします。

インキュベーション中、代謝活性細菌は無色の酸化還元色素を不溶性の赤色生成物に還元します。

運動性細菌は、べん毛を使用して半固体培地を増殖および移動し、周囲の培地に外側に放射状に広がる拡散した赤いゾーンを作成します。

非運動性細菌は増殖しますが、移動しません。レッドゾーンは穿刺部位に限定されたままです。

これにより、非運動性細菌株と運動性細菌株を視覚的に区別できます。

寒天プレートから細菌の単一コロニーをピックアップし、接種針を使用して穿刺して両方の半固体培地に接種します。非モーダル株をネガティブコントロールとして、モーダル株をポジティブコントロールとして含めることを忘れないでください。

チューブを摂氏37度でインキュベートし、24〜48時間のインキュベーション後に結果を観察します。穿刺線のみが赤の場合は、細菌を非モーダルとして特徴付けます。

赤い色が穿刺線に沿って外側に広がる場合は、細菌をモーダルとして特徴付けます。