熱ストレスラットの腸内微生物転座に対する有益菌の影響の評価

有益な細菌で前処理された実験ラットと、リン酸緩衝生理食塩水またはPBSを投与した対照ラットから始めます。

両方のラットを高温にさらして、生理学的ストレスを誘発します。

対照ラットでは、熱ストレスによって腸上皮バリアが破壊され、腸由来細菌が移動して内臓に広がります。

しかし、実験ラットでは、有益な細菌が上皮接合部を保存し、細菌の転座を減少させるシグナル伝達分子を放出します。

各ラットから採取した肝臓サンプルを含むチューブを取ります。

PBSを加え、サンプルを均質化して、バクテリアをバッファーに放出します。

希釈したホモジネートを栄養豊富な寒天プレートに広げます。

プレートをインキュベートして、細菌のコロニーを形成します。次に、コロニーを数えます。

対照サンプルのコロニー数が多いほど、腸バリアの破壊と細菌の転座を示します。

対照的に、実験サンプル中のコロニーが少ないということは、腸内への細菌の転座を制限する有益な細菌の効果を示しています。

枯 草菌 BSB3またはPBSによる経口強制投与によりラットを2日間処理した後、動物を細分化して体温を測定した後、グループ1および2のラットを室温で25分間保持します。グループ3と4の動物を摂氏45度、相対湿度55%の気候室に25分間置きます。

次に、動物を安楽死させ、体幹の血液を採取し、テキストプロトコルに従って臓器を分離した後、各チューブに滅菌PBSを添加して、サンプルの体積希釈あたり1〜10重量を取得し、滅菌ガラス組織ホモジナイザーを使用して均質な組織懸濁液を生成します。

次に、滅菌PBSを使用して各サンプルを連続希釈します。次に、0.1ミリリットルのすべての希釈液をマッコンキー寒天培地と5%血液寒天培地、およびヘミンとビタミンK1を含むブルセラ血液寒天培地の表面にプレートします。プレートをインキュベートした後、コロニーカウンターを使用して、プレートの各グループのコロニーをカウントします。