生物発光を用いたマウスモデルにおける細菌感染のリアルタイムイメージング

遺伝的に統合された生物発光オペロンを発現させるように設計された病原性細菌株に事前に感染させた麻酔マウスを例に挙げましょう。

オペロンはルシフェラーゼとその基質を合成する多酵素複合体をコードします。

ルシフェラーゼ酵素はこれらの基質と反応を触媒し、可視的な発光を生じさせます。

画像室の温度安定プラットフォームにマウスを仰向けに置き、画像診断中は麻酔を維持します。

イメージングシステムを用いて、マウスの発光画像と対応するX線画像の両方を撮影します。

生物発光画像は細菌感染の範囲を示し、X線画像は感染の位置特定のための解剖学的基準を提供します。

画像検査後、マウスをケージに戻し、回復を待ちます。

細菌感染のリアルタイム進行を監視するために、定期的に発光画像を撮影します。

時間が経つにつれて、さまざまな場所での生物発光信号の存在が、感染が宿主全体に広がることが確認されます。

動物を撮影するには、カメラのパラメータを設定し、ステージを加熱してイメージングシステムを準備します。酸素流量を1.5リットル毎分、イソフルランを3.5%に設定し、マウスを麻酔室へ移動させ、その後麻酔後に温度安定化段階に移します。マウスを仰向けにして腕を伸ばし、画像診断時に2.5%イソフルランを投与するための鼻コーンを装着します。

ドアを閉めて、ネズミの発光画像とX線を撮ってください。画像診断が終わったら、マウスをケージに戻して監視します。3〜5分以内に意識を取り戻すはずです。