JoVE 実験百科事典
Neuroscience
0 回視聴 • 2:09 分 • July 8th, 2025
坐核またはNAc領域に活性炭微小電極を埋め込み、左半球に基準線を移植した、固定化され、麻酔をかけたラットから始めます。
これらの電極は、ドーパミンによって生成された電気信号を測定するポテンショスタットに接続されています。
ガイドカニューレを備えた刺激電極が腹側被蓋領域または VTA に埋め込まれ、NAc 領域に投射されるドーパミン作動性ニューロンを標的とします。
VTAニューロンを活性化する刺激電極を介して電気パルスを印加し、化学メッセンジャーであるドーパミンをNAc領域に放出します。
NAc 領域では、ドーパミンが炭素電極と相互作用し、酸化と還元を起こし、ベースラインの電気信号を生成します。
内部カニューレをガイドカニューレに挿入し、活性化剤または阻害剤のいずれかを注入します。
活性化剤は VTA ニューロンを刺激し、ドーパミンの放出を増加させ、電気信号を上昇させます。
対照的に、阻害薬はドーパミンの放出を防ぐことによって電気信号を減少させます。
20〜30分間、3分ごとに動物を刺激します。安定したベースラインを達成した後、内部カニューレをバイポーラ刺激装置に事前に取り付けられたガイドカニューレに手でゆっくりと下げ、さらに2〜3回のベースライン記録を取得して、カニューレの挿入が誘発信号に変化を引き起こさなかったことを確認します。
ベースライン反応が確立されたら、マイクロシリンジ内のシリンジポンプを使用して、0.5マイクロリットルの目的の薬物溶液を2分間にわたってVTAに注入します。注入後、取り外す前に少なくとも 1 分間内部カニューレを所定の位置に置いたままにし、注入後の効果を測定するために 3 分ごとに反応を記録し続けます。