JoVE 実験百科事典
Neuroscience
0 回視聴 • 2:26 分 • August 7th, 2025
怪我を防ぐために、麻酔をかけた遺伝子組み換えマウスの子犬を反対方向のイヤーバーを使用して定位固定フレームに固定します。
子犬の海馬は抑制性介在ニューロンを減少させ、興奮性ニューロンの過興奮を引き起こします。
頭を平らに保ち、子犬を氷で覆い、麻酔を長引かせます。
頭蓋骨を消毒し、ラムダ縫合糸を基準点として識別します。
注射針をターゲット海馬座標に配置します。
曲げた針を使用して、頭蓋骨の損傷を最小限に抑えながらマイクロエントリー穴を作成します。
針を目標の深さまで下げ、制御された速度でヒト由来の介在ニューロン前駆細胞を注入し、組織の損傷を最小限に抑えます。
細胞の逆流を防ぐために、針をゆっくりと引っ込めます。
子犬をフレームから取り出し、動きが再開するまで温めてから、ケージ内のごみに戻します。
注入された前駆細胞は海馬全体に分散し、成熟し、ニューロンネットワークに統合されます。時間が経つにつれて、それらは抑制伝達を強化し、興奮性と抑制性のバランスを回復します。
子犬を定位固定フレームに置き、イヤーバーを反対方向に使用して、子犬を配置します。次に、エタノールに浸した軟部組織を使用して皮膚の表面をきれいにします。ラムダを識別し、定位固定装置のデジタルディスプレイコンソールで座標を0に設定します。
ハミルトン注射器を目的の座標に移動した後、90度曲げたインスリン針を使用して頭蓋骨を貫通し、小さな穴を作ります。次に、針が頭蓋骨を横切るまでハミルトン注射器を下ろし、背腹座標を0
にします。目的の背腹座標が得られるまで針を下げます。幹細胞が注入されたら、針をゆっくりと引っ込めます。子犬を母親に返す前に、子犬が動き始めるまで手で温めて手順を終了します。