Name: 足場のないマウス卵胞培養のためのカスタマイズ可能なアガロースモールドの製造と使用 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: 学ぶ 足場のないアガロースモールドを用いたマウス卵胞培養法。3Dプリント製型を使い、卵胞の成長と排卵率を向上させ、生殖生物学研究におけるin vitro培養技術の新たな可能性を示す。

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<table><tbody><tr><td><ストロング>材料・化学</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;50 mL 発泡スチロール遠心分離機管</td><td>グローブ・サイエンティフィック</td><td>941-11017-CS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL マイクロ遠心分離機チューブ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>MCT-150</td><td>スナップ、凍結、保存のためにメディアを保存するために</td></tr><tr><td>100mmディッシュ、未処理</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>08-757-100D&nbsp;</td><td>アガロースマイクロモールドの製造と保存</td></tr><tr><td>100%エタノール</td><td>メルセデス・サイエンティフィック</td><td>1200</td><td>組織処理</td></tr><tr><td>1000 & micro;L&nbsp;ピペットの先端、保持率が低い</td><td>中科学</td><td>PR-1000BK</td><td>文化のヒント&nbsp;</td></tr><tr><td>200 & マイクロ;L&nbsp;ピペットの先端、保持率が低い</td><td>中科学</td><td>PR-200BK</td><td>文化のヒント&nbsp;</td></tr><tr><td>24ウェルプレート</td><td>コーニング</td><td>353047</td><td>文化</td></tr><tr><td>35mmアンテナ</td><td>ファルコン</td><td>351008</td><td>卵巣を分離し、エニズマティック培地で培養するために</td></tr><tr><td>エタノール95%</td><td>メルセデス・サイエンティフィック</td><td>1210</td><td>組織処理</td></tr><tr><td>アガロース</td><td>ホーファー</td><td>GR140</td><td>マイクロモールド</td></tr><tr><td>バイオエクストラ ミネラルオイル、ライトオイル、マウス胚細胞培養に適しています</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M5310-500ML</td><td>生体適合性の脱モールド剤として使用</td></tr><tr><td>牛血清アルブミン&nbsp;</td><td>MPバイオメディカル</td><td>103700</td><td>グロースメディア</td></tr><tr><td>クリーニングダスター、10オンス、6個入りパック</td><td>オフィスデポ&nbsp;</td><td>110284</td><td>圧縮空気</td></tr><tr><td>クリアV4レジン 1L</td><td>Formlabs, Inc</td><td>RS-F2-GPCL-04</td><td>3Dプリンティング樹脂</td></tr><tr><td>コーニング 再利用可能なプラスチック低量型100 mLビーカー、ポリプロピレン、目盛り</td><td>コーニング</td><td>1000P-100</td><td>シリコーン成分の混合用ビーカー&nbsp;</td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>キアゲン</td><td>79254</td><td>酵素媒体</td></tr><tr><td>エコフレックス 00-45 ほぼクリア</td><td>スムースオン社</td><td>B09M8Y9PTV</td><td>シリコーン材料</td></tr><tr><td>F-12 + グルタMAX</td><td>ギブコ</td><td>31765-035</td><td>グロースメディア</td></tr><tr><td>胎児牛胎児</td><td>シグマ</td><td>F-3385</td><td>グロースメディア</td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>ピーク血清</td><td>PS-FB2</td><td>解剖媒体、酵素媒体、およびメンテナンスメディア&熟成媒体</td></tr><tr><td>フィッシャーブランド&nbsp;滅菌ポーチ</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>01-812-50&nbsp;</td><td>滅菌ポーチ</td></tr><tr><td>卵胞刺激ホルモン(FSH)</td><td>EMDセロノ社</td><td>ゴナール-F処方のみ&nbsp;</td><td>グロースメディア&熟成媒体</td></tr><tr><td>Gibco&nbsp;DPBS、カルシウム、マグネシウム</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-040-182 &nbsp;</td><td>ダルベッコのリン酸塩緩衝塩水</td></tr><tr><td>ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>C1063-1VL</td><td>熟成媒体</td></tr><tr><td>インスリン-トランスフェリン-セレン(ITS)</td><td>サーモフィッシャー</td><td>41400045</td><td>グロースメディア</td></tr><tr><td>インビトロジェン分子プローブ ロダミン・ファロイジン</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>R415</td><td>卵子細胞骨格染色</td></tr><tr><td>体外受精料理</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>150260</td><td>卵胞の分離、選択、そして前平衡化のために</td></tr><tr><td>Leibovit'z 15 (L15)</td><td>ギブコ</td><td>11415-064</td><td>ディスセクションメディア&酵素媒体</td></tr><tr><td>リベラーゼ</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>5401119001</td><td>酵素媒体</td></tr><tr><td>MEM?+ グルタマックス</td><td>ギブコ</td><td>32561-037</td><td>メンテナンスメディア、そしてnbsp;グロースメディア&熟成媒体</td></tr><tr><td>マウス表皮成長因子(EGF)</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>354010</td><td>熟成媒体</td></tr><tr><td>ナルジネ 透明ポリカーボネート クラシックデザイン 乾燥器</td><td>サーモ・サイエンティフィック</td><td>5311-0250</td><td>真空乾燥器&nbsp;</td></tr><tr><td>パラフィン</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>83-30</td><td>組織処理および埋め込み</td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン</td><td>ギブコ</td><td>15140-122</td><td>解剖媒体、酵素媒体およびメンテナンスメディア</td></tr><tr><td>ストリッパーチップ</td><td>オリジオ</td><td>MXL3-200</td><td>文化</td></tr><tr><td>VECTASHIELD PLUSアンチフェードマウントメディウム(DAPI搭載)</td><td>ベクター研究所</td><td>H-2000</td><td>卵核染色</td></tr><tr><td>キシレン</td><td>メルセデス・サイエンティフィック</td><td>9840</td><td>組織処理</td></tr><tr><td>&α;-チューブリン(11H10)ウサギmAb(Alexa Fluor 488 Conjugate)</td><td>細胞シグナル伝達技術</td><td>5063S</td><td>卵チューブリン染色</td></tr><tr><td><ストロング>装備</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>プラットフォーム2建設</td><td>Formlabs, Inc</td><td>BP-F3-02-01&nbsp;</td><td>3Dプリンターコンポーネント</td></tr><tr><td>Dino-Lite Edge AF4915ZTL、USB 2.0</td><td>ダイノライト</td><td>AF4915ZTL</td><td>タイムラプスセットアップ用のイメージャー</td></tr><tr><td>フォーム3 レジンタンク V2.1&nbsp;</td><td>Formlabs, Inc</td><td>RT-F3-02-01</td><td>3Dプリンターコンポーネント</td></tr><tr><td>フォーム3B+3Dプリンター</td><td>Formlabs, Inc</td><td>F3B-P-プリンター</td><td>Formlabsのステレオリソグラフィー(SLA)3Dプリンター</td></tr><tr><td>形の治療&nbsp;</td><td>Formlabs, Inc</td><td>FH-CU-01</td><td>硬化プラットフォーム&nbsp;</td></tr><tr><td>フォームウォッシュ</td><td>Formlabs, Inc</td><td>FH-WA-01</td><td>洗浄プラットフォーム</td></tr><tr><td>ポンプ式の蒸気化スプレーボトル</td><td>VWR</td><td>0309-3005</td><td>脱臼剤を塗る</td></tr><tr><td>Edgeシリーズ(T5、T8モデルを除く)向けのライトフォーカサー/コンセントレーターキャップ</td><td>ダイノライト</td><td>N3C-R</td><td>タイムラプスセットアップ用のイメージャーコンポーネント</td></tr><tr><td>RK-10ラックとRK-10-EXアームエクステンションを組み合わせたマウントホルダーバンドル</td><td>ダイノライト</td><td>RK-10A</td><td>タイムラプスセットアップ用のイメージャーコンポーネント</td></tr><tr><td>組織埋め込み機</td><td>ライカ</td><td>ヒストコア・アルカディア</td><td>マイクロモールドを埋め込むために</td></tr><tr><td>ティッシュプロセッサー</td><td>ライカ</td><td>TP1020</td><td>マイクロモールドの加工</td></tr><tr><td>211DSシェイキングインキュベーター(軌道シェーカー)</td><td>Labnet International</td><td>I-5211-DS</td><td>卵胞を放出するために酵素培地で卵巣を培養すること</td></tr><tr><td>Software&nbsp;</強さ></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Autodesk Fusion</td><td>オートデスク社</td><td></td><td>コンピュータ支援設計(CAD)ソフトウェア。AutodeskはAutodesk Educationプログラムを通じて無料の教育アクセスを提供しています。</td></tr><tr><td>DinoCapture 3.0 バージョン 1.1.1.3 &nbsp;</td><td>ダイノライト</td><td></td><td></td></tr><tr><td>イメージJ</td><td>国立衛生研究所</td><td></td><td>OCT画像の解析と卵胞の測定</td></tr><tr><td>プレフォーム</td><td>Formlabs, Inc</td><td></td><td>Formlabsのステレオリソグラフィー(SLA)プリンターと連携して動作するよう設計された無料のプリント準備ソフトウェアです。nbsp;</td></tr></tbody></table>

足場のないマウス卵胞培養のためのカスタマイズ可能なアガロースモールドの製造と使用

Production and Use of Customizable Agarose Molds for Scaffold-Free Mouse Ovarian Follicle Culture

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that produces hormones and gametes needed to sustain female reproductive function and health. The ...

production-use-customizable-agarose-molds-for-scaffold-free-mouse

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

3Dフィブリン-アルギン酸相互貫入ネットワークにおける卵胞のカプセル化のための新しい方法が記載されている。このシステムは、成熟した卵母細胞を生成するために未熟な卵胞の発達をサポートするためにタンパク質分解と構造的な支持を兼ね備えています。このメソッドは、拡張を制限することなく、細胞間接触を維持するために培養細胞の集合体に適用してもよい。...

タンパク質分解的に分解性3次元システムにおける卵胞のカプセル化と文化のための方法

それらの三次元コンテキストで正常な細胞の培養は、細胞の形質転換および腫瘍形成に必要な初期の事象を研究するための代替メソッドを表します。このメソッドは、卵巣癌の形成の初期イベントを研究するために、通常の卵巣と卵管の細胞を成長させるために使用されます。...

卵巣と卵管の三次元器官培養用アルギン酸ゲル

このプロトコルは、新生児マウスと思春期前のマウスからの個々の卵胞から卵巣を使って、マウスの卵巣組織の初代培養/共培養を説明しています。培養技術は、卵巣上の外因性薬剤の効果の研究を可能にする、高度に生理的な方法で開発を支援し、卵胞の間の相互作用の。...

文化と共培養マウスの卵巣と卵胞

このプロトコルでは、カスタマイズされた 3 D プリントのプラスチック金型を使用して可変サイズの自己生成組織リングを製造するためのプラットフォームについて説明します。3 D プリントされた鋳型の硬化 PDMS ネガアガロースは硬化の PDMS ネガのキャストになります。セルがどこ彼らは組織リングに集計結果の agarose...

細胞播種用カスタム Agarose 井戸とティッシュ リング自己組織型の 3 D プリントを使用しての作製

ここでは、3D培養条件でのブタ卵母細胞のカプセル化のための2つのプロトコルを示します。第1に、cumulus-oocyte複合体(COC)はフィブリンアルギン酸ビーズにカプセル化される。第2に、フッ素化エチレンプロピレン粉末粒子(マイクロバイオリアクター)で封入される。両システムは、3D組織を維持するために最適な条件を保証します。...

ポルシン卵母細胞カプセル化のためのタンパク質分解アルギン酸ヒドロゲルおよび疎水性マイクロバイオリアクター

ここでは、原発性新生児マウス精巣細胞から精巣オルガノイドを生成する4つの方法、すなわち、細胞外マトリックス(ECM)およびECMフリーの2Dおよび3D培養環境について説明する。これらの技術は、複数の研究アプリケーションを持っており、体外で精巣の発達と生理学を研究するために特に有用である。...

細胞外マトリックスベースおよび細胞外マトリックスフリーのマウス精巣オルガノイドの生成

本プロトコルは、3Dプリントされたスタンプ様デバイスを使用して、大規模かつ費用対効果の高い方法で組織スフェロイドを作製する技術を記載している。...

3Dプリントされたスタンプ状デバイス による 組織スフェロイドの生成

このプロトコールは、チラミン結合ヒアルロン酸ハイドロゲルを用いてマウス卵巣から前胞状卵胞をカプセル化し、培養するための新しい3次元(3D)培養モデルについて述べています。また、ガラス化による卵巣卵胞凍結保存への2つのアプローチについても詳しく説明します。...

新規ヒアルロン酸ハイドロゲルの三次元卵胞培養への応用とマウス卵巣卵胞凍結保存の方法論

この研究では、アガロース型にマイクロウェルを作製するためのスタンプベースのシステムを使用して、3D細胞構造を生成するための費用対効果が高く効率的な方法論を提示します。このシステムは、均一なスフェロイド/オルガノイドの形成を促進し、細胞相互作用を改善します。このアプローチは、実験のばらつきを減らし、薬物試験や組織工学への応用をサポートします。...

新規スタンプデバイスを用いた二次元細胞培養からの三次元スフェロイド/オルガノイドの作製

私たちは、卵巣の間質豊富な部分からマウス卵巣体細胞を単離する方法と、足場を使わない方法でマウス卵巣体細胞オルガノイドを生成する方法を述べます。...

卵巣微小環境の探査:マウス卵巣体細胞の単離、2次元培養、オルガノイド培養の方法

学ぶ 足場のないアガロースモールドを用いたマウス卵胞培養法。3Dプリント製型を使い、卵胞の成長と排卵率を向上させ、生殖生物学研究におけるin vitro培養技術の新たな可能性を示す。

足場のないマウス卵胞培養のためのカスタマイズ可能なアガロースモールドの製造と使用

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