Name: アグロバクテリウム媒介によるフィトフトラ・パルミヴラの簡易化方法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T13:15:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: 学ぶアグロバクテリウム媒介によるPhytophthora palmivoraの簡易変換法。P. capsiciにも適用可能で、植物病理学における遺伝子機能解析やタンパク質局在解析、病原体感染動態の追跡に有用な再現性の高いプロトコルです。

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<ol><li>Kamoun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+top+10+oomycete+pathogens+in+molecular+plant+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">The top 10 oomycete pathogens in molecular plant pathology.</a> Mol Plant Pathol. 16 (4), 413-434 (2015).</li>
<li>Jones, J. D., Staskawicz, B. J., Dangl, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+plant+immune+system%3A+From+discovery+to+deployment%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The plant immune system: From discovery to deployment.</a> Cell. 187 (9), 2095-2116 (2024).</li>
<li>Tocafundo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+cross-pathogenicity+of+Phytophthora+palmivora+against+cacao%2C+papaya%2C+and+peach+palm%5BTitle%5D)+AND+%22Trop+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Direct and cross-pathogenicity of Phytophthora palmivora against cacao, papaya, and peach palm.</a> Trop Plant Pathol. 46 (6), 664-673 (2021).</li>
<li>Morales-Cruz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+whole-genome+duplications+define+the+architecture+of+the+genomes+of+the+devastating+West+African+cacao+black+pod+pathogen+Phytophthora+megakarya+and+its+close+relative+Phytophthora+palmivora%5BTitle%5D)+AND+%22G3+%28Bethesda%29%22%5BJournal%5D)">Independent whole-genome duplications define the architecture of the genomes of the devastating West African cacao black pod pathogen Phytophthora megakarya and its close relative Phytophthora palmivora.</a> G3 (Bethesda). 10 (7), 2241-2255 (2020).</li>
<li>Ali, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PCR-based+identification+of+cacao+black+pod+causal+agents+and+identification+of+biological+factors+possibly+contributing+to+Phytophthora+megakarya%27s+field+dominance+in+West+Africa%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">PCR-based identification of cacao black pod causal agents and identification of biological factors possibly contributing to Phytophthora megakarya's field dominance in West Africa.</a> Plant Pathol. 65 (7), 1095-1108 (2016).</li>
<li>Marelli, J. -P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chocolate+under+threat+from+old+and+new+cacao+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Chocolate under threat from old and new cacao diseases.</a> Phytopathology. 109 (8), 1331-1343 (2019).</li>
<li>Cvitanich, C., Judelson, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+transformation+of+the+oomycete%2C+Phytophthora+infestans%2C+using+microprojectile+bombardment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Genet%22%5BJournal%5D)">Stable transformation of the oomycete, Phytophthora infestans, using microprojectile bombardment.</a> Curr Genet. 42 (4), 228-235 (2003).</li>
<li>Judelson, H. S., Tyler, B. M., Michelmore, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transformation+of+the+oomycete+pathogen%2C+Phytophthora+infestans%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">Transformation of the oomycete pathogen, Phytophthora infestans.</a> Mol Plant Microbe Interact. 4 (6), 602-607 (1991).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((an+oxathiapiprolin-resistance+gene%2C+functions+as+a+novel+selection+marker+for+Phytophthora+transformation+and+CRISPR%2FCas9+mediated+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">an oxathiapiprolin-resistance gene, functions as a novel selection marker for Phytophthora transformation and CRISPR/Cas9 mediated genome editing.</a> Front Microbiol. 10, 2402(2019).</li>
<li>Dai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+transformation+system+for+Phytophthora+cinnamomi+using+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">An improved transformation system for Phytophthora cinnamomi using green fluorescent protein.</a> Front Microbiol. 12, 682754(2021).</li>
<li>Fang, Y., Cui, L., Gu, B., Arredondo, F., Tyler, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+genome+editing+in+the+oomycete+Phytophthora+sojae+using+CRISPR%2FCas9%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Efficient genome editing in the oomycete Phytophthora sojae using CRISPR/Cas9.</a> Curr Protoc Microbiol. 44 (1), 21A.1.1-21A.1.26 (2017).</li>
<li>Evangelisti, E., Yunusov, T., Shenhav, L., Schornack, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-acetyltransferase+AAC+%283%29-i+confers+gentamicin+resistance+to+Phytophthora+palmivora+and+Phytophthora+infestans%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">N-acetyltransferase AAC (3)-i confers gentamicin resistance to Phytophthora palmivora and Phytophthora infestans.</a> BMC Microbiol. 19 (1), 265(2019).</li>
<li>Dong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+the+straightforward+electro-transformation+system+for+Phytophthora+infestans+and+its+comparison+with+the+improved+PEG%2FCaCl2+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microbiol+Methods%22%5BJournal%5D)">Establishment of the straightforward electro-transformation system for Phytophthora infestans and its comparison with the improved PEG/CaCl2 transformation.</a> J Microbiol Methods. 112, 83-86 (2015).</li>
<li>Huitema, E., Smoker, M., Kamoun, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+straightforward+protocol+for+electro-transformation+of+Phytophthora+capsici+zoospores%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">A straightforward protocol for electro-transformation of Phytophthora capsici zoospores.</a> Methods Mol Biol. 712, 129-135 (2011).</li>
<li>Vijn, I., Govers, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+tumefaciens+mediated+transformation+of+the+oomycete+plant+pathogen+Phytophthora+infestans%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of the oomycete plant pathogen Phytophthora infestans.</a> Mol Plant Pathol. 4 (6), 459-467 (2003).</li>
<li>Wu, D., Navet, N., Liu, Y., Uchida, J., Tian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+simple+and+efficient+Agrobacterium-mediated+transformation+system+for+Phytophthora+palmivora%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Establishment of a simple and efficient Agrobacterium-mediated transformation system for Phytophthora palmivora.</a> BMC Microbiol. 16 (1), 204(2016).</li>
<li>Gumtow, R., Wu, D., Uchida, J., Tian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Phytophthora+palmivora+extracellular+cystatin-like+protease+inhibitor+targets+papain+to+contribute+to+virulence+on+papaya%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">A Phytophthora palmivora extracellular cystatin-like protease inhibitor targets papain to contribute to virulence on papaya.</a> Mol Plant Microbe Interact. 31 (3), 363-373 (2018).</li>
<li>Pettongkhao, S., Navet, N., Schornack, S., Tian, M., Churngchow, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+secreted+protein+of+15+kDa+plays+an+important+role+in+Phytophthora+palmivora+development+and+pathogenicity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A secreted protein of 15 kDa plays an important role in Phytophthora palmivora development and pathogenicity.</a> Sci Rep. 10 (1), 2319(2020).</li>
<li>Minz, A., Sharon, A. Electroporation and Agrobacterium-mediated spore transformation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMinz%2C+A+%22Molecular+and+Cell+Biology+Methods+for+Fungi%22">Molecular and Cell Biology Methods for Fungi</a>. Sharon, A. , Humana Press. Totowa, NJ. 21-32 (2010).</li>
<li>Bellemain, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ITS+as+an+environmental+DNA+barcode+for+fungi%3A+An+in+silico+approach+reveals+potential+PCR+biases%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">ITS as an environmental DNA barcode for fungi: An in silico approach reveals potential PCR biases.</a> BMC Microbiol. 10 (1), 189(2010).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+Agrobacterium-mediated+transformation+for+two+oomycete+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">A modified Agrobacterium-mediated transformation for two oomycete pathogens.</a> PLoS Pathog. 19 (4), e1011346(2023).</li>
<li>Wu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+Agrobacterium-mediated+sorghum+transformation+protocol+and+molecular+data+of+transgenic+sorghum+plants%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Plant%22%5BJournal%5D)">Optimized Agrobacterium-mediated sorghum transformation protocol and molecular data of transgenic sorghum plants.</a> In Vitro Cell Dev Biol Plant. 50 (1), 9-18 (2014).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TDNAscan%3A+A+software+to+identify+complete+and+truncated+T-DNA+insertions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">TDNAscan: A software to identify complete and truncated T-DNA insertions.</a> Front Genet. 10, 685(2019).</li>
<li>Navet, N., Tian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium-mediated+transformation+of+sweet+basil+%28Ocimum+basilicum%29%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium-mediated transformation of sweet basil (Ocimum basilicum).</a> Bio Protoc. 10 (22), e3828-e3828 (2020).</li>
<li>Hasley, J., Dinulong, R. -J., Adhikari, A., Christopher, D., Tian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+editing+of+papaya+using+both+Cas9+and+Cas12a%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Genome editing of papaya using both Cas9 and Cas12a.</a> bioRxiv. , (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL マイクロ遠心分離機チューブ</td><td>VWR</td><td>525-1126</td><td></td></tr><tr><td>4'-ヒドロキシ-3'、5'ジメトキシアセトフェノン</td><td>TCI</td><td>D2666</td><td>アセトシリンゴン(AS)</td></tr><tr><td>50 mLチューブ</td><td>グライナー・バイオワン</td><td>227261</td><td></td></tr><tr><td>絶対エタノール</td><td>フィッシャー・バイオリエージェント</td><td>BP28184</td><td></td></tr><tr><td>寒天</td><td>フィッシャー・バイオリエージェント</td><td>BP1423-500</td><td></td></tr><tr><td>アルミニウム箔</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ハイボンド-N+膜(30 cm & 時間:3 m)</td><td>シチバ</td><td>RPN303B</td><td></td></tr><tr><td>炭酸カルシウム</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>239216-500G</td><td>CaCO3</td></tr><tr><td>セフタキシムナトリウム塩</td><td>サーモ・サイエンティフィック・ケミカルズ</td><td>AAJ6269006</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-グルコース</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>G8270-1KG</td><td></td></tr><tr><td>DNeasy PowerLyzer 微生物キット</td><td>キアゲン</td><td>12255-50</td><td></td></tr><tr><td>鉗子</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>蛍光顕微鏡</td><td>ツァイス</td><td></td><td>ZEISS アクシオスコープ5蛍光顕微鏡(フィルターセット38 HE)</td></tr><tr><td>G418硫酸塩</td><td>サーモ・サイエンティフィック・ケミカルズ</td><td>AC329400010</td><td></td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>911046-1L</td><td></td></tr><tr><td>血球計(ブライトライン)</td><td>ハウサー・サイエンティフィック</td><td></td><td></td></tr><tr><td>カナマイシン硫酸塩</td><td>サンタクルーズ・バイオテクノロジー</td><td>SC-257635</td><td></td></tr><tr><td>L-アスパラギン無水</td><td>MPバイオメディカル</td><td>ICN10079425</td><td></td></tr><tr><td>LBブロス、ミラー</td><td>フィッシャー・バイオリエージェント</td><td>BP1426-2</td><td></td></tr><tr><td>硫酸マグネシウム・ヘプタハイドレート</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>63138-250G</td><td>MgSO4&middot;7H2O</td></tr><tr><td>MESハイドレート</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M2933-100G</td><td></td></tr><tr><td>ムラシゲとスクーグ基底培地</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>M5519-50L</td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿(100 mm x 15 mm)</td><td>VWR</td><td>25384-342</td><td></td></tr><tr><td>リン酸二水素カリウム</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>1370391000</td><td>KH2PO4</td></tr><tr><td>リファンピシン</td><td>サンタクルーズ・バイオテクノロジー</td><td>SC-200910</td><td></td></tr><tr><td>Taq 2Xマスターミックス</td><td>NEB</td><td>M0270L</td><td></td></tr><tr><td>チアミン塩酸塩</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>T4625-5G</td><td></td></tr><tr><td>紫外線可視光分光光度計</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-385-355</td><td></td></tr><tr><td>V8オリジナル 100%野菜ジュース</td><td>キャンベルスープ社</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ボルテクサー</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14-955-163</td><td></td></tr><tr><td>水</td><td></td><td></td><td>分子生物学グレード、Mill-Q水浄化システムによる精製</td></tr><tr><td>酵母エキス</td><td>アクロス</td><td>611805000</td><td>現在はThermo Scientific Chemicalsで入手可能です</td></tr><tr><td>β;-シトステロール</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>85451-100G</td><td></td></tr></tbody></table>

アグロバクテリウム媒介によるフィトフトラ・パルミヴラの簡易化方法

A Simplified Method for Agrobacterium-mediated Transformation of Phytophthora palmivora

Phytophthora is an oomycete genus that contains numerous destructive plant pathogens, among which is the broad-host-range species P. palmivora. Functional ...

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アグロバクテリウム媒介によるフィトフトラ・パルミヴラの簡易化方法

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