Name: 膜タンパク質の単一分子局在顕微鏡法による単一抗体標識法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: 学ぶ単一抗体標識法による膜タンパク質の単一分子局在顕微鏡法。T細胞膜におけるナノスケールの抗体・エピトープ相互作用を可視化し、治療用抗体の細胞内環境での挙動を詳細に観察する手法です。

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<table><tbody><tr><td>抗CD81 Alexa fluor 488抗体</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>MA5-44132</td><td>画像検査抗体</td></tr><tr><td>ベンチトップ遠心分離機</td><td>エッペンドルフ</td><td>5424</td><td></td></tr><tr><td>牛血清アルブミン</td><td>ミリポーアシグマ</td><td>A7906-100G</td><td></td></tr><tr><td>チャンバー付きカバーガラス、8ウェル</td><td>セルヴィス</td><td>C8-1-N</td><td></td></tr><tr><td>DMEMメディア</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>11960069</td><td></td></tr><tr><td>ダルベッコのリン酸塩緩衝塩水</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>胎児用牛血清</td><td>ミリポーアシグマ</td><td>F0926-500ML</td><td></td></tr><tr><td>グルターアルデヒド、10%</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>16120</td><td></td></tr><tr><td>金コロイド、100nm</td><td>テッド・ペラ</td><td>15711年以降;20</td><td>受託マーカー</td></tr><tr><td>浸漬油&nbsp;</td><td>カーギル研究所</td><td>16245</td><td></td></tr><tr><td>逆立顕微鏡&nbsp;TIRFモジュールを装備</td><td>ニコン・インストゥルメンツ</td><td>エクリプス Ti2-E</td><td>顕微鏡</td></tr><tr><td>ジュルカット E6.1 細胞株</td><td>ミリポーアシグマ</td><td>88042803-1VL</td><td>サスペンションセル</td></tr><tr><td>レーザーローンチ、6ライン</td><td>オクシウス</td><td>L6CC-CS8-1511</td><td>励起レーザー</td></tr><tr><td>リポフェクタミン 2000</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>11668019</td><td>トランスフェクション試薬</td></tr><tr><td>マイクロ遠心分離機チューブ、1.5 mL&nbsp;</td><td>VWR</td><td>89000-028</td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡イメージングソフトウェア</td><td>ニコン・インストゥルメンツ</td><td>NIS-エレメンツ先端研究</td><td>画像取得ソフトウェア</td></tr><tr><td>目的値、100倍/1.49 CFI APO TIRF&nbsp;</td><td>ニコン・インストゥルメンツ</td><td>MRD01991</td><td>顕微鏡対物レンズ</td></tr><tr><td>パラホルマルデヒド、16%</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>15140-122</td><td>抗生物質</td></tr><tr><td>ポリL-リジン溶液、0.01%&nbsp;</td><td>ミリポーアシグマ</td><td>P4707-50ML</td><td></td></tr><tr><td>プライム95B sCMOSカメラ</td><td>テレダイン・ビジョン・ソリューションズ</td><td>01-プライム-95B-R-M-16-C</td><td>カメラ</td></tr><tr><td>RPMI 1640メディア</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>11875-093</td><td>懸濁セル用媒体</td></tr><tr><td>アジ化ナトリウム</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>19038-1000</td><td></td></tr><tr><td>ホウ水素化ナトリウム</td><td>ミリポーアシグマ</td><td>213462-25G</td><td></td></tr><tr><td>T25培養フラスコ</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>169900</td><td></td></tr><tr><td>テトラスペック微小球</td><td></td><td></td><td>受託マーカー</td></tr><tr><td>組織培養皿、100mm&nbsp;</td><td>コーニング</td><td>353003</td><td></td></tr><tr><td>U2OS細胞株</td><td>ATCC</td><td>HTB-96</td><td>粘着細胞</td></tr></tbody></table>

膜タンパク質の単一分子局在顕微鏡法による単一抗体標識法

Single-Molecule Localization Microscopy of Membrane Proteins using Single-Antibody Labeling

The plasma membrane defines the cell shape and serves as the interface that governs intercellular communication. Membrane proteins constitute a major ...

single-molecule-localization-microscopy-membrane-proteins-using

Research

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Bioengineering

私たちは、細胞内の複数の種類の蛍光標識分子を同時にイメージングするための蛍光光活性化局在化顕微鏡(FPALM)の使用を実証します。記載されている技術は、単一細胞内で数十ナノメートルの精度で、数千から数十万の個々の蛍光標識タンパク質の局在をもたらします。...

蛍光光活性化局在顕微鏡による生体構造の同時マルチカラーイメージング

このプロトコルは、全反射蛍光顕微鏡を使用して、生細胞の表面上の単一の受容体を視覚化し、追跡し、それによって受容体の横方向の移動性、受容体複合体のサイズを分析し、一過性の受容体-受容体相互作用を視覚化する方法を説明しています。このプロトコールは、他の膜タンパク質に拡張することができます。...

単一分子蛍光顕微鏡による受容体ダイナミクスの高分解能時空間解析

タンパク質官能基化平面ガラス支持脂質二重膜の調製、タンパク質内のタンパク質移動度の決定、およびタンパク質密度の測定がここに示されている。ノイズを低減した全反射顕微鏡を構築するためのロードマップが概説されており、これにより、高い時空間分解能で単一の二重層常在蛍光色素を視覚化できます。...

平面支持された二分子層​​上の単一分子蛍光顕微鏡

我々は、蛍光標識された抗体の逐次結合および溶出を用いて、単一分子精度で異種ナノ構造内の複数の分子をイメージングする方法を実証する。...

madSTORMを用いたT細胞の高度に多重化された超解像イメージング

生きた細胞の細胞内小器官のマルチカラー単一膜蛋白質のローカリゼーションのためのプロトコルを紹介します。蛍光物質を添付、自己ラベリング タンパク質を使用します。~ 18 の精度と同じ細胞小器官の異なる膜コンパートメントに位置するタンパク質をローカライズできる...

単一の膜タンパク質生きた哺乳類細胞の細胞内小器官のマルチカラー ローカリゼーション顕微鏡

彼らは生きた細胞から分泌される、単一ラベルのない蛋白質のリアルタイム光検出のためのプロトコルを提案します。これは干渉散乱 (iSCAT) 顕微鏡は、様々...

無料のラベル画像の単一蛋白質細胞から分泌される生活 iSCAT 顕微鏡を介して

ここでは、単一分子レベルの複雑な蛋白質のサンプルのそれぞれのタンパク質種のラベリングの均質性を評価するためのプロトコルを提案する.

プロテオーム的分類の単一分子レベルでの均一性の定量化

3D単分子局在顕微鏡は、生きた細菌細胞における蛍光標識タンパク質の空間位置および運動軌道をプローブするために利用される。本明細書に記載される実験およびデータ分析プロトコルは、プールされた単一分子軌道に基づいてサイトソリックタンパク質の一般的な拡散挙動を決定する。...

単一分子トラッキング顕微鏡 - 細胞細胞分子の拡散状態を決定するツール

このプロトコルは、iSCATベースの画像処理と単粒子追跡アプローチを記述し、脂質膜と相互作用する高分子の分子量と拡散挙動の同時調査を可能にします。サンプル調製、質量コントラスト変換、ムービー取得、および後処理に関するステップバイステップの手順が、潜在的な落とし穴を防ぐための指示とともに提供されます。...

膜関連高分子ダイナミクスを特徴付けるための質量感受性粒子追跡

ここでは、単一分子全反射蛍光(smTIRF)顕微鏡を使用して、人工混雑した脂質膜上の単一分子の結合、移動度、および組み立てを実行および分析するためのプロトコルが提示されます。...

高分子密集脂質膜上での1分子拡散と集合

本記事では、固体支持脂質二重層における単一タンパク質追跡用のサンプル作成方法を詳しく説明します。また、単一分子感度と高速フレームレートを持つシンプルな蛍光顕微鏡の説明もします。最後に、単一タンパク質の軌跡抽出手順を概説します。...

蛍光顕微鏡を用いた脂質二重層中の単一タンパク質の追跡

学ぶ単一抗体標識法による膜タンパク質の単一分子局在顕微鏡法。T細胞膜におけるナノスケールの抗体・エピトープ相互作用を可視化し、治療用抗体の細胞内環境での挙動を詳細に観察する手法です。

膜タンパク質の単一分子局在顕微鏡法による単一抗体標識法

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